蛋白质化学4的学习材料.pptxVIP

蛋白质化学4的学习材料;二、蛋白质的生物学意义;三、蛋白质的化学组成;蛋白质的含氮量;(二）蛋白质的分子组成;(三)蛋白质的其他组分;三、蛋白质的基本单位--氨基酸;第8页/共129页;天然氨基酸除脯氨酸和甘氨酸外，其余均属于L-α-氨基酸。 除甘氨酸外，氨基酸均含有一个手性?-碳原子，因此都具有旋光性和立体异构。 各种氨基酸的区别在于侧链R基团（Radical)不同。;苏氨酸;苯丙氨酸;(二）氨基酸的分类;;③按营养状况分 必需氨基酸 非必需氨基酸 2.稀有氨基酸 是正常氨基酸的衍生物 在遗传上没有直接的三联密码. (3)非蛋白质氨基酸 不在蛋白质分子中出现的氨基酸 大多是α-氨基酸的衍生物 也有D-型和 ?-、γ-、δ-氨基酸. ;（三）氨基酸的理化性质：;2.两性解离及等电点：;Pk2是AA的-NH3+ 被滴定一半时的pH （ NH3+释放H+）;等电点的概念: 氨基酸分子上的-NH3+和-COO-解离度完全相同； 氨基酸所带的净电荷为零； 些时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。 等电点（pI）时溶解度最小。 ;等电点的推导;[Ala+]=;整理：K1 K2 [Ala±]= [Ala±] [H+] [H+];中性氨基酸：pI = (pK1 + pK2 )/2 酸性氨基酸：pI = (pK1 + pKR-COO- )/2 碱性氨基酸：pI = (pK2 + pKR-NH2 )/2 pK 1指α-羧基离解常数的负对数值； pK 2指α-氨基离解常数的负对数值 pK R指侧链R基离解常数的负对数值。 ;3.紫外吸收性质：;氨基酸的紫外吸收光谱;4.氨基酸的化学反应;;AA与茚三酮反应;;用途：末端基氨基酸测定;;肽:若干氨基酸通过肽键聚合而成的链状化合物。 肽键:肽分子中，一个氨基酸分子的α-羧基与另一个氨基酸分子的α-氨基经脱水形成的酰胺键（-CO-NH）。 二肽.三肽:根据成肽的氨基酸数目命名. 寡肽：10肽以下称之。 多肽： 10肽以上称之。 氨基酸残基：氨基酸成肽后已不完整，故称之。 肽单位：与肽键相连的六个原子（C?1,C,O,N,H,C ? 2)组成的肽平面。 ;氨基酸残基与肽单位;第33页/共129页;氨基酸的顺序：指从“N”端→“C”端氨基酸的排列顺序。 肽的表示法:按氨基酸的顺序依次读为某氨酰某氨酰……某氨酸。 如：谷氨酰半胱氨酰甘氨酸. 简称：谷胱甘肽 简式：Glu·Cys·Gly;（三）生物活性肽：;1. 谷胱甘肽（GSH）：;;2. 多肽类激素： ;+H3N-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-COO-;五、 蛋白质的结构;（一）蛋白质的一级结构;胰岛素（Insulin）：;2、蛋白质一级结构的测定;3.一级结构测定的意义： ;蛋白质一级结构的变异与分子病 在镰刀状红细胞贫血患者中，由于基因突变导致血红蛋白β-链第六位氨基酸残基由谷氨酸改变为缬氨酸，血红蛋白的亲水性明显下降，从而发生聚集，使红细胞变为镰刀状。 氨基酸顺序 1 2 3 4 5 6 7 8 HbA Val.His.Leu.Thr.Pro.Glu.Glu.Lys HbS Val.His.Leu.Thr.Pro.Val.Glu.Lys;细胞色素c的一级结构与生物进化的关系;1.样品纯化（纯度97%以上）； 2.测定蛋白质的分子量； 3.末端分析 N端分析：PITC法 DNFB法 Edman法 DNS-CL法 C端分析：肼解法, 羧肽酶法 4.拆分多肽链: 可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理 5.用两种以上方法特异性裂解： 肽链内切酶（胰蛋白酶） 化学试剂（溴化氰） 6.分离纯化肽段：双向电泳 7.测定氨基酸组成 ： 氨 基酸自动分析仪(峰图） 8. 跨切口重迭肽段，分析氨基酸顺序;;DNFB法分析N-端氨基酸残基;Edman降解法测定氨基酸序列;用途：末端基氨基酸测定;;羧肽酶是一种肽链外切酶，它能从多肽链的C-端逐个的水解。;蛋白质的特异裂解;胰蛋白酶（trypsin)的裂解作用;BrCN的裂解作用;氨基酸自动测序仪;第58页/共129页;确定肽段在多肽链中的次序;（二）蛋白质的空间结构;1.概述;乙烷的构象;⑵ 决定蛋白质空间构象的因素 ① 蛋白质的氨基酸序列 ②肽键的刚性平面性质 由于C=O双键中的π电子云与N原子上的未共用电子对发生“电子共振”，使肽键具有部分双键的性质，不能自