YC_T 508-2014 烟草霜霉病检疫规程 负压温室隔离试种.docx

ICS 65.160 X 85 备案号：46593--2014 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 YC/T 508—2014 烟草霜霉病检疫规程 负压温室隔离试种 Quarantine rules for tobacco blue mold(Peronospora tabacina)—Isolated screening in the negative air pressure greenhouse 2014-07-23发布 2014-08-15实施 国家烟草专卖局 发 布 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 烟草霜霉病检疫规程 负压温室隔离试种 YC/T 508—2014 关 中 国 标 准 出 版 社 出 版 发 行 北京市朝阳区和平里西街甲2号(100029) 北京市西城区三里河北街16号(100045) 网 址 总编室：(010 发行中心：(010读者服务部：(010中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 开本880×1230 1/16 印张0.75 字数15 千字 2014年11月第一版 2014年11月第一次印刷 关 书号：155066 · 2 - 27363 如有印装差错 由本社发行中心调换 版权专有 侵权必究 举报电话：(010I YC/T 508—2014 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会农业分技术委员会(SAC/TC 144/SC 2)归口。 本标准起草单位：云南省烟草农业科学研究院、云南出入境检验检疫局、上海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：陈学军、肖炳光、李永平、刘勇、李梅云、曾建敏、杨碧、戚龙君、杨彦明。 1 YC/T 508—2014 烟草霜霉病检疫规程 负压温室隔离试种 1 范围 本标准规定了国外引进烟草种子负压温室隔离试种期内烟草霜霉病的检测规程。 本标准适用于从国外引进的烟草种子和花粉。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 15699 烟草霜霉病检疫规程 GB/T 25241.1 烟草集约化育苗技术规程 第1部分：漂浮育苗 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 隔离检疫负压温室 isolated quarantine negative pressure greenhouse 具有一定的负压差、光照、水分、温湿度条件调节及杀菌消毒功能的温室。主要用于进口植物的隔 离试种，专门进行病虫害检疫。 3.2 隔离试种检测 isolated screen for the introduced tobacco cultivars and germplasm 在隔离检疫负压温室内，对报检后的国外引进烟草品种进行一个生长周期内的试种，观察是否携带 检疫性烟草霜霉病菌的过程。 4 设施、仪器及试剂 4.1 设施 烟草隔离检疫负压温室应配备负压系统、水处理系统、消毒系统、计算机智能控制系统，具备遮荫、灌 溉、通风换气及升降温条件。附属设施包括焚烧炉、材料与工具预处理室及植保检测室等。温室负压值为 15 Pa～50 Pa,温度范围为15℃~25℃,相对湿度为90%士5%,光照强度大于300μmol ·m-2 · s-1。 4.2 仪器 数码显微镜、培养箱、超净工作台、冰箱、高速冷冻离心机、焚烧炉、高压灭菌锅、微波炉、基因扩增仪 (PCR 仪)、电泳仪、凝胶成像仪、紫外分光光度计、恒温水浴锅、移液器。 4.3 试 剂 1 0 % 的 NaClO 溶液、Taq 酶、琼脂糖、氯化镁(MgCl? )、 牛血清白蛋白(BSA)、 脱氧核糖核苷三磷酸 2 YC/T 508—2014 (dNTP)、 三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、DNA 提取试剂盒等。 5 烟草种子的霜霉病检测 烟草种子霜霉病检测按GB/T 15699 的规定执行。 6 消毒 6.1 土壤消毒 取三年内未裁种过茄科作物的土壤，根据市售土壤熏蒸剂使用方法盖膜熏蒸消毒7d,揭膜通风，通 风期间可翻动土壤2次～3次，通风14 d 后备用. 6.2 育苗基质消毒 育苗基质装入消毒袋，121℃湿热灭菌15 min 后备用。 6.3 育苗盘消毒 用终浓度为1