new蛋白质的共价结构.pptVIP

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1).化学裂解法 溴化氰(CNBr)与肽链中Met残基侧链的硫醚基发生反应,生成环化的溴化亚氨内酯,此产物水解后,产生高丝氨酸内酯,使蛋氨酸羧基端的肽键断裂。 这一方法的优点是产率高(可达85%)、专一性强,故实际应用较多。 甲硫氨酸,人体唯一的含硫必需AA 目前六十二页\总数九十一页\编于十五点 氰化物,带有氰基(CN)的化合物 cyanide [sai?,naid] 叁键给予氰基以相当高的稳定性,使之在通常的化学反应中都以一个整体存在。 该基团具有和卤素类似的化学性质,常被称为拟卤素。 有机氰化物可分类为腈jīng (C-CN)异腈(C-NC) 目前六十三页\总数九十一页\编于十五点 苦杏仁中毒机理主要是由于苦杏仁苷被肠道菌群中的β-葡萄糖苷酶水解,产生氢氰酸而被吸收。 氰离子能与细胞色素氧化酶的三价铁(Fe3+)结合,阻断了氧化呼吸过程中电子的传递,致使血红蛋白丧失携氧能力,最后组织细胞因缺氧而窒息。 有报道,成人一次口服生苦杏仁40-60粒可中毒,50-100粒可致死。亦有文献报道,小儿口服5粒引起中毒,服10余粒致死的。 目前六十四页\总数九十一页\编于十五点 3)、脑啡肽 Leu-脑啡肽 Met-脑啡肽 神经递质,有镇痛作用而又不会像吗啡那样使病人上瘾的药物 目前三十页\总数九十一页\编于十五点 吗啡是鸦片中最主要的生物碱(含量约10-15%),1806年法国化学家F·泽尔蒂纳首次从鸦片中分离出来。 分离得到的白色粉末在狗和自己身上进行实验,结果狗吃下去后很快昏昏睡去,用强刺激法也无法使其兴奋苏醒;他本人吞下这些粉末后也长眠不醒。据此他用希腊神话中的睡眠之神吗啡斯(Morphus)的名字将这些物质命名为“吗啡”。 目前三十一页\总数九十一页\编于十五点 脑啡肽(endorphin),是一种内成性(脑下垂体分泌)的类吗啡生物化学合成物激素。它能与吗啡受体結合,产生跟吗啡、鸦片剂一样有止痛和欣快感。等同天然的镇痛剂。 runners high 1975年,两个小组分别自猪脑和牛脑中发现 2008年3月《Science》 目前三十二页\总数九十一页\编于十五点 4)、胰高血糖素 ——29肽 目前三十三页\总数九十一页\编于十五点 4、肽的物理和化学性质 离子晶体,熔点高,两性离子。 1、双缩脲反应(biuret reaction)是肽和蛋白质所特有的一个反应。一般含有两个或两个以上的肽键的化合物与CuSO4碱性溶液都能发生双缩脲反应面生成紫红色或兰紫色复合物 利用这个反应可以以分光光度计法测定蛋白质含量(非蛋白质特异性) 目前三十四页\总数九十一页\编于十五点 目前三十五页\总数九十一页\编于十五点 肽的等电点如何求出? 2、两性离子 目前三十六页\总数九十一页\编于十五点 +H3N—His—Glu—Val—COO- COO- 查P133 pK9.17 pK6.00 pK4.25 pK2.32 2.32 4.25 6.00 9.17 + - +2 +1 0 -1 -2 pK=4.25*6/2=5.125 目前三十七页\总数九十一页\编于十五点 蛋白质分子的一级结构及其测定 一级结构 组成多肽链的氨基酸残基的 连接方式和排列顺序 二硫键 目前三十八页\总数九十一页\编于十五点 蛋白质的一级结构: (Primary structure) 组成蛋白质的多肽链数目 多肽链的氨基酸顺序 多肽链内或链间二硫键的数目和位置 目前三十九页\总数九十一页\编于十五点 1,样品必需纯(97%以上); 2,知道蛋白质的分子量; 3,知道蛋白质由几个亚基组成; 4,测定蛋白质的氨基酸组成;并根据分子量计算每种氨基酸的个数。 5,测定水解液中的氨量,计算酰胺的含量。 测定蛋白质的一级结构的要求 目前四十页\总数九十一页\编于十五点 三、蛋白质一级结构的测定 1.氨基酸组成分析 2.氨基酸末端分析 3.蛋白质中肽链的拆离 4.肽链的部分降解及肽片断的分离 5.肽段氨基酸顺序测定及肽段重叠 6. 二硫键与酰胺基的定位 目前四十一页\总数九十一页\编于十五点 1.氨基酸组成分析 目前四十二页\总数九十一页\编于十五点 N-末端分析 C-末端分析 2.氨基酸末端分析 N末端测定方法比C末端更加成熟、可靠和准确, 目前四十三页\总数九十一页\编于十五点 N-末端分析 二硝基氟苯法(FDNB法) 二甲基氨基萘磺酰氯法(DNS-Cl法) 异硫氰酸苯酯法(Edman法) 氨基酸末端分析 2.氨基酸末端分析 N-末端分析 目前四十四页\总数九十一页\编于十五点 二硝基氟苯法(FDNB法) 1945年由Sanger 发明此法 曾用此方法测 定了胰岛素的 N -末端

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