DB64 536_2009  草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程.docx

DB64 宁 夏 回 族 自 治 区 地 方 标 准 DB64/T 536—2009 草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程 2009-01-07发布 2 0 0 9 - 0 1 - 0 7 实 施 宁夏回族自治区质量技术监督局发布 DB64/T 536—2009 目 次 目 次 I 前言 I 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 分类与分级 1 5 要求 1 6 脱毒种苗的培育 2 7 病虫害防治 6 DB64/T 536—2009 前 言 本标准由宁夏农林科学院提出。 本标准由宁夏农牧厅归口。 本标准主要起草单位：宁夏农业生物技术重点实验室。 本标准主要起草人：宋玉霞、王敬东、刘宝山、马洪爱、陈晓军、高晓原、郭生虎、甘晓燕、朱永 新、惠红霞、关雅静、李苗。 H 5 要求 DB64/T 536—2009 草莓脱毒种苗培养及繁育技术规程 1 范围 本标准规定了草莓脱毒种苗的定义、繁育技术、分类、分级、质量要求、栽培技术、运输与贮存。 本标准适用于宁夏各地采用草莓花药培养脱毒及种苗繁育。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本规范，然而，鼓励根据本规范达成协议的各方研究 可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本规范。 GB 4285 农药安全使用标准 GB/T 8321 (所有部分) 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY 5104 无公害食品 草莓产地环境条件 NY 5105 无公害食品草莓生产技术规程 3 术语和定义 本标准采用下列术语和定义。 3.1 草莓脱毒苗 经组织培养脱毒处理或直接引进，经检测后确认不携带草莓斑驳病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病 毒、草莓轻型黄边病毒的种苗。 3.2 草莓脱毒组培(瓶)苗 指采用植物组织培养的方法，经检测获得的不带草莓斑驳病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病毒、草 莓轻型黄边病毒的组培(瓶)苗。 3.3 草莓脱毒原原种苗 指将草莓脱毒组培(瓶)苗移栽于无草莓病源、虫源的隔离区成活的植株。 3.4 草莓脱毒原种苗 指由草莓脱毒原原种苗匍匐茎繁殖的植株。 3.5 草莓脱毒生产苗 指由草莓脱毒原种苗匍匐茎繁殖用于生产草莓的植株。 4 分类与分级 脱毒苗按繁育过程可分为脱毒组培(瓶)苗、脱毒原原种苗、脱毒原种苗和脱毒生产苗四类。 脱毒组培(瓶)苗按质量要求分为一级、二级、三级。 2 DB64/T 536—2009 5.1 产地环境 5.1.1 产地环境质量 产地环境条件应符合NY5104 的规定。 5.1.2 土壤条件 土层较深厚，肥沃，结构疏松，中性土壤，有机质含量在2.5%以上，且排灌方便。 5.2 施肥原则及允许使用的肥料 5.2.1 施肥原则 按 NY/T 496规定执行。施用的肥料应是在农业行政主管部门已经登记或免于登记的肥料和各种农 家肥。限制使用含氯复合肥。不准施用未经无害化处理的城市废弃物制成的肥料。 5.2.2 允许使用的肥料种类 有机肥料 包括堆肥、沤肥、厩肥、沼气肥、绿肥、作物秸秆肥、泥炭肥、饼肥、腐殖酸类肥、人畜废弃物加 工而成的肥、氨基酸类肥等。 无机肥料 包括氮肥、磷肥、钾肥、硫肥、钙肥、镁肥及复合(混)肥、微量元素类等。 6 脱毒种苗的培育 6.1 脱毒组培(瓶)苗的培育 6.1.1 培养基 采用改良MS 培养基。 6.1.2 材料准备 依据花器的形态特征及镜检取样。将取回的新鲜花蕾置4℃冰箱预处理2天～3天。 取样时间 选择草莓盛花期进行取样。宁夏多为日光温室栽培，在12月中旬～1月上旬，上午9时～11时在 温室取样。 取样方法 a) 草莓花蕾的形态 花萼未开放，花蕾(直径3毫米～5毫米)略长于花冠或花冠刚露白，花冠白色或淡绿色且不松动， 花药微(淡)黄而充实。 b) 镜检 镜检确定为花粉单核靠边期的花药作为外植体。 接种方法 接种时在超净工作台上先将外植体用75%的酒精浸泡10秒，再用0.1%升汞消毒8分钟，用无菌水冲 洗3遍～5遍。手捏花柄，用眼镊剥掉花冠和萼片，轻轻取出花药放入已灭菌的培养基上， 一朵花(花 3 DB64/T 536—2009 药20枚左右)接一瓶，切勿将花丝和花冠以及其它二倍体组织接入。 6.1.3 培养条件 诱导培养时需暗培养，培养温度为28℃±2℃。分化培养和继代培养需光培养，用20001x～30001x 日光灯，光照10小时～12小时，培养温度为25℃±2℃。 6.1.4 诱导培养 接完一朵花立即用封口膜封闭瓶口