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实验细菌的简单染色和革兰氏染色;革兰氏染色;◆用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染;第4页/共27页;实验三 细菌的简单染色和 革兰氏染色;细菌的简单染色和革兰氏染色;一 目的要求;（一）细菌的简单染色原理
（二）革兰氏染色基本原理;细菌细胞微小，且含水量较多，在普通光镜下表现为无色透明，不易观察，所以必须进行染色处理，使细胞着色，便于观察。
简单染色是使用单一染料染色，可用于观察细菌形态、大小、及排列方式.
染色前一般要将细胞固定，其目的是杀死菌体并使之粘附于玻片上，还可以增强菌体的着色能力。固定有加热法和化学法两种，无论采用何种方法均应维持细胞原有形态。 ;（二）革兰氏染色基本原理;占细胞壁的10%;第12页/共27页;1、细胞壁;;革兰氏染色原理：
第一步：结晶紫使菌体着上紫色
第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。
第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。
G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，蕃红复染后呈红色。;1;三 实验材料;四 无菌操作过程;;（一） 简单染色操作步骤;第21页/共27页;（二）革兰氏染色操作步骤;;六 实验报告;;七 思考题;感谢观看!
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