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一种Klotho+/-基因缺失斑马鱼.pdfVIP

一种Klotho+/-基因缺失斑马鱼.pdf

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    本发明利用CRISPR/Cas9技术，构建成了Klotho+/‑基因缺失斑马鱼，具体步骤包括：1)根据Klotho基因序列，确定靶位点；2)制备gRNA；3)体外转录Cas9mRNA；4)将Cas9mRNA和gRNA混合，注射到单细胞期斑马鱼胚胎中；5)将F0胚胎饲养至性成熟；6)与野生型成鱼外交，筛选F0；7)选取可产生有效突变的F0自交，筛选F1。本发明构建的Klotho+/‑基因缺失斑马鱼可用于动脉硬化、骨质疏松症、高磷血症、血管和软组织钙化领域的研究。

    (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113215199 A (43)申请公布日 2021.08.06 (21)申请号 202110475042.0 (22)申请日 2021.04.29 (71)申请人 广州博

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