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一种TLR4基因缺失斑马鱼模型.pdfVIP

一种TLR4基因缺失斑马鱼模型.pdf

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    本发明涉及一种TLR4基因缺失斑马鱼的构建，具体步骤包括CRISPR/Cas9基因敲除靶位点设计；构建sgRNA体外转录载体；sgRNA体外转录、纯化及鉴定；制备Cas9mRNA；筛选最高突变效率的sgRNA，用于获得F0胚胎，所述sgRNA序列为5’‑GCCTCTAACGATATAGATGA‑3’；将F0胚胎饲养至性成熟；与野生型成鱼外交，筛选F0；选取可产生有效突变的F0自交，筛选F1；从F1代突变体中挑选相同突变的雌鱼和雄鱼，杂交得到F2代；本发明构建的TLR4基因缺失斑马鱼可稳定遗传，

    (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113249385 A (43)申请公布日 2021.08.13 (21)申请号 202110488818.2 (22)申请日 2021.04.30 (71)申请人 广州博识生物

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