微生物的实验室培养优质.pptxVIP

微生物的实验室培养优质;1.了解有关培养基的基础知识； 2.掌握无菌操作技术； 3.了解纯化大肠杆菌的基础知识。;到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关;;细菌的外形与大小;芽孢; ;菌落;放线菌;链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素 ;第11页/共58页; 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。;（一）培养基的类型及其应用：;半固体培养基：;液体培养基：;标准; 根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定。 缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 ; 天然培养基有血清、血浆和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限；成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析；易发生支原体污染。;血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分;选择培养基; ; 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录内容P83);牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。;5. 配制原则;【典例解析】; 例3．下表是对四种微生物的能源、碳源、氮源新陈代谢类型的叙述，正确的是（ ）;（三）无菌技术;　⑴消毒定义： 　　利用化学或物理方法，杀死物体表面或内部的部份微生物（不含芽胞和孢子）的过程。;1.煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min 2.巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃ 下煮15min 3.化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源 4.紫外线消毒……;1.灼烧灭菌 2.干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。 3.高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min。;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;例5．下面对发酵??程中灭菌的理解不正确的是（ ） A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前;例7．高温灭菌的原理是（ ） A.每种微生物生长的最适温度是一定的 B.微生物对于高温环境不适应 C.高温破坏的细胞内的蛋白质、核酸 D.高温降低了环境中氧的浓度;（四）微生物实验室培养的基本操作程序;1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方;倒平板;1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？;3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？;例8.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是（ ）;例9.有关倒平板操作错误的是（ ）;二.大肠杆菌的纯化培养：;平板划线接种;平板划线法;2：每次划线前灼烧接种环的目的：;4.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？;稀释涂布平板法;6支试管，分别加入9ml无菌水;浸; 注意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处.;问题讨论;3．平板划线法和稀释涂布平板法的比较;⑴平板划线法：;（三）菌种的保藏：;四、课题成果评价 ;微生物的培养;编号;⑶若除去成分②，加入（CH2O），该培养基可用于培养 。 ⑷表中营养成分共有 类。 ⑸不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是 。 ⑹右表中各成分重量确定的原则是 。 ⑺若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是 。;感谢观看！