生物分离工程之两水相萃取法.pptxVIP

生物分离工程之两水相萃取法第1页/共79页 成相聚合物的回收(1) 压力敏感型两水相(2) 热促相分离高聚物EO-PO(3) pH敏感型高聚物（聚两性离子高聚物, 多聚电解质)(4) 光敏感相分离高聚物第2页/共79页 压力诱导相分离第3页/共79页 第4页/共79页 加氨基酸对相图的影响第5页/共79页 加氨基酸对相密度的影响第6页/共79页 氨基酸的分离配系数第7页/共79页 系线长度与分配系数第8页/共79页 热诱导相分离第9页/共79页 EO-PO-HP-EOPO第10页/共79页 高聚物结构式第11页/共79页 相体系回收示意图第12页/共79页 相 图第13页/共79页 盐的分配第14页/共79页 蛋白纯化第15页/共79页 EOPO-HPEOPO高聚物回收第16页/共79页 pH 诱导相分离第17页/共79页 第18页/共79页 第19页/共79页 第20页/共79页 第21页/共79页 第22页/共79页 第23页/共79页 Phase separationTop phaseBottom phaseRecycleLight pHLight pH Recycling Polymers Forming Aqueous Two-phase Systems 第24页/共79页 光敏感聚合物合成第25页/共79页 Table 1 Probability of PNBC with different components with varied composition to form aqueous two-phase systemssystems1 (% w/w)2 (%w/w)3 (:%w/w)two-phasesPNBC：PEG60003.3:6.72.5:103.0:8.0noPNBC：PEG200003.3:6.72.5:103.0:8.0noPNBC：PPG3.3:13.32.5:203.0:16turbidPNBC：Dex200003.3:3.32.5:6.73.0:4.0yesPNBC：SDS3.3:6.72.5:103.0:8.0turbidPNBC：Tween 3.3:33.32.5:503.0:40noPNBC：EO30PO703.3:6.72.5:103.0:8.0noPNBC：IPA3.3:33.32.5:503.0:40noPNBC：（NH4）2SO43.3:6.72.5:103.0:8.0precipitationThe number 1, 2, 3 denotes the initial volume ratio 1:1, 2:1, 3:2, respectively. All systems were stood for one day at 20℃.第26页/共79页 Fig 1.Phase diagram for PNBC-Dextran in water solution at 20℃. Figure 2. Repeated recovery of polymer in aqueous solutionFigure 3 Recovery comparison of light-sensitive radiation and thermo-sensitive precipitation of PNBC polymer in two-phase systems. The concentration of salts in total phases was 50mM. The initial volume ratio is 3:2(ml/ml).第27页/共79页 两水相系统的应用蛋白质纯化抗生素，氨基酸，天然成分酶相转移催化细胞器分离第28页/共79页 第29页/共79页 第30页/共79页 第31页/共79页 第32页/共79页 第33页/共79页 第34页/共79页 光敏感可再生两水相中青霉素酰化酶催化青霉素G为6-APA第35页/共79页 图 6－APA在系列盐系统中的分配系数K第36页/共79页 第37页/共79页 图6.3 不同系统中PG的酶催化转化率图6.4 PA浓度变化PG的转化率（未加盐） 图6.5 PA浓度变化PG的转化率（50mM KCl） 配制5%PNBC300000-40%Dextran20000两水相体系45 ml(pH7.8,含0.1M 磷酸盐缓冲液)，上下体积比为8:1，加入固定化酶0.10g（0.2，0.3g）,青霉素G（Na）0.40g,于20℃振荡反应，每60 min测定6-APA浓度,计算青霉素G转化率。第38页/共79页 重复批转化反应与上述相体系基本相