沙门氏菌的检验.pptxVIP

沙门氏菌的检验第1页/共52页 主要内容修订背景国内外方法修订内容 前增菌 选择性增菌 分离平板生化鉴定 血清学鉴定报告第2页/共52页 修订背景第3页/共52页 历史回顾 回顾一下食品卫生微生物学检验标准的制定，经历了从无到有，从事该领域的工作者，花费了巨大的心血，先后制修订了84版、94版、和2003版的检验标准，每版的标准，都为该年代的食品卫生工作提供了巨大的技术支持，同时也深深地烙上了该时代的经济特征。第4页/共52页 必要性 由于食品生产及流通的全球化、新的食品加工技术的应用、东西方饮食习惯的交融、自然环境的改变等因素的影响，目前沙门氏菌污染的食物种类、季节及场所发生了重大变化。同时，随着检测技术的发展，对于沙门菌的快速检测方法层出不穷，有些方法已通过国际权威机构认证（如AOAC）成为了国际标准方法。 第5页/共52页 任务来源1. 修订任务由卫生部全国食品卫生标准委员会下达，由微生物标准协作组具体实施。2. 兄弟单位、企业、公司为参与单位。 3. 共采集到数据800多个，专家反馈意见50余条（采纳90%以上）条，形成标准的草案稿、送审稿。4 . 时间跨度2004年—2006年第6页/共52页 修定原则 结合目前的国际标准和原标准的实际使用情况，针对原标准的修订，我们遵循以下的修订原则：1．以原国标为基础，保持与原标准的连续性；2．参照国际分析协会（AOAC）、国际标准组织（ISO）及美国食品药品管理局（FDA）的有关标准；3．结合标准的比对实验和验证实验，积极吸取新方法、新技术，修订标准。第7页/共52页 修定依据1. GB/T4789.42. AOAC Official Method ：967.26，967.27，967.283. ISO ：65794 . USFDA ： Bacteriological Analytical Manual, Chapter 5: Salmonella。 第8页/共52页 修改内容1 前增菌；2选择性增菌；3 分离；4 生化鉴定；5. 血清学鉴定；6.报告。第9页/共52页 国内外方法比较第10页/共52页 国内外沙门氏菌检测方法（传统方法）国家标准USFDAFSISAOAC ISO第11页/共52页 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品前增菌法25g＋BPW225mL36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h10mL＋MM（或TTB）100mL10mL＋SC100mL直接增菌法25g＋灭菌生理盐水25mL检样匀液25mL ＋MM（或TTB）100mL检样匀液25mL ＋SC100mLBSDHL（或HE、WS、SS）TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸沙门氏菌血清学试验甘露醇 山梨醇H2S＋ 靛＋ 尿－KCN－ 赖＋H2S－ 靛－ 尿－KCN－ 赖＋/－非如左述的各种反应结果沙门氏菌血清学试验 ONPG －沙门氏菌非沙门氏菌42 ℃ 18h～24h36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h42 ℃ 18h～24h36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h 微生物学检验 沙门氏菌检验中华人民共和国国家标准GB/T 4789.4-2003第12页/共52页  样品（20类）25g225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）pH6.8±0.2 24±2 h 35℃RVTT 43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h 24±2h 42±0.2℃BS XLD HE 24±2h 35℃TSI LIA非沙门菌沙门菌非沙门菌LIA+LIA－ TSI K/ALIA－ TSI A/A尿素酶，H抗原（多价H抗血清或Spicer-Edwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶，酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN，丙二酸盐，吲哚），O抗原酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI）+O抗原H抗原细菌学分析手册（FDA/BAM）第五章 沙门菌属第13页/共