一种GS基因敲除CHO-K1细胞株的构建方法及悬浮细胞单克隆化.pdfVIP

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2023-06-21 发布于四川
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一种GS基因敲除CHO-K1细胞株的构建方法及悬浮细胞单克隆化.pdf

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本发明公开了一种GS基因敲除的CHO‑K1细胞株的构建方法，包括贴壁培养CHO‑K1细胞，设计并选择sgRNA，将选择的sgRNA与EGFPmRNA、Cas9mRNA组成转染混合物对CHO‑K1共转染，得到GS基因敲除的CHO‑K1细胞株。本发明使用RNA转染混合物对CHO‑K1细胞进行共转染，是一种基于RNA的GS敲除方法，同时结合CRISPR/Cas9基因编辑手段以及结合GFP筛选，既避免了DNA层面的基因组重整，降低了基因组被污染的风险，又提高了GS基因敲除效率，还降低了细胞筛选的工作量

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113355360 A (43)申请公布日 2021.09.07 (21)申请号 202110588787.8 (22)申请日 2021.05.28

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