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本发明公开了一种适于翘嘴鲌受精卵Mstn基因敲除的方法及应用,属于基因编辑技术领域,包括将敲除试剂使用显微注射的方法注入翘嘴鲌受精卵胚胎中,获得Mstn基因缺失型翘嘴鲌模型,上述敲除试剂包括sgRNA、Cas9蛋白和酚红指示剂,其中sgRNA的序列如SEQIDNO.1所示。本发明采用RNP形式通过显微注射直接递送Cas9蛋白和sgRNA到翘嘴鲌的受精卵中,提高了基因编辑效率。显微注射法能够绕过细胞外基质、细胞膜及细胞质等多层屏障,以最直接的方式将sgRNA和Cas9蛋白精确递送到细胞核或细胞质
(19)国家知识产权局
(12)发明专利
(10)授权公告号 CN 113462692 B
(45)授权公告日 2023.03.31
(21)申请号 202110817988.0 C12N 15/89 (2006.01)
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