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营养器官培养 第一页，共十页，2022年，8月28日 第六章 营养器官培养 教学目的： 掌握植物根、茎、叶培养的一般方法和技术，尤其是茎段培养的方法及其特点，熟悉植物营养器官培养的应用技术。 教学重点： 1、根的培养； 2、茎的培养； 3、叶的培养。 教学难点： 植物营养器官培养的应用。 第二页，共十页，2022年，8月28日 营养器官培养： 指利用植物的根、茎、叶等器官的全部、部分或器官原基进行的离体培养，在无菌的人工环境中经过培养发育最终形成幼苗。 第三页，共十页，2022年，8月28日 第一节 根的培养 一、离体根培养的意义： 研究根系生理和代谢、器官分化与形态建成。 二、离体根培养的技术： 1、根无性系的建立：改良White培养基 种子消毒 发芽获得无菌种苗 取的根尖 液体培养，25℃黑暗条件 7-10d继代一次，取主根增殖 2、离体根培养的试验系统：需特殊装置 由液体培养和固体培养两部分构成，根尖部分处于液体培养基中，而根茎部分则插入含有机成分的固体培养基中。 三、培养示例： 番茄、胡萝卜、蝴蝶兰离体根的培养。 第四页，共十页，2022年，8月28日 第二节 茎的培养 一、茎培养的意义： 1、用于无性系快速繁殖：变异率低，增殖快。 2、用于脱除植物病毒：提高植物产量和品质 3、用于育种：茎尖遗传性稳定，可快速繁殖新品种，加速优良品种推广 ①传统的无性繁殖：繁殖系数一般为1:10，推广慢； ②离体繁殖：不受季节限制，繁殖系数为几十至几百倍，推广快。 4、用于形态建成研究：取材便利，培养条件可严格控制，且可排除其它部位的影响，实验重复性强。 第五页，共十页，2022年，8月28日 二、茎培养的方法 1、建立无菌材料： （1）母体材料的选择： ①母体的选择：欲脱毒材料的品种典型性；外植体健康程度选择。 ②外植体的大小：根据不同植物材料及培养目的而定，快繁一般为，脱除病毒则要求0.01-1mm。 （2）茎尖培养再生植株：外植体消毒 茎尖剥离 茎尖培养 ①外植体消毒：70%酒精+0.1%升汞 ②茎尖剥离：一般在解剖镜下剥离带两个叶原基的茎尖 ③茎尖培养：常采用MS基本培养基，配合一定的植物生长调节剂。 第六页，共十页，2022年，8月28日 二、茎培养的方法 2、茎尖的发育方向及其调节： （1）茎尖的发育方向： ①腋芽萌发； ②脱分化后产生胚状体； ③脱分化后直接产生不定器官； ④脱分化后形成愈伤组织。 （2）茎尖发育方向的调节： ①外植体大小：微型外植体或分生组织趋向于形成愈伤组织； ②植物生长调节剂：细胞分裂素与生长素的比值。 第七页，共十页，2022年，8月28日 二、茎培养的方法 3、生根成苗及移栽： （1）生根培养： 茎尖培养物的生根是成苗的关键，一般胚状体可直接萌发成苗，但腋芽和不定芽则须转入生根培养基上培养成苗。 （2）促进试管苗生根的措施： ①降低基本培养基无机盐的浓度，一般采用1/2MS培养基或改良White基本培养基； ②调节生长素浓度，采用IBA或可促进生根； ③添加吸附剂，加入适量活性炭有利于生根； ④减少琼脂用量，以支持小苗生长为度，可促进生根。 （3）生产用苗的培植： 一般试管苗需经过炼苗、假植和定植等过程，以提高其对自然环境条件的适应性。 第八页，共十页，2022年，8月28日 第三节 叶的培养 一、离体叶培养的意义： 以叶原基为外植体，可研究叶的形态发生、光合作用、叶绿素的形成及遗传转化等。 二、离体叶培养的技术： 常用Heller培养基，且对光的依赖性强。 取幼叶消毒 切成1cm2左右接种（平置，最好叶背朝下） 诱导愈伤组织 分化形成胚状体、茎、叶、根等。 三、培养示例： 香石竹、长寿花、杨树、中华猕猴桃、绿巨人、蝴蝶兰叶的培养。 第九页，共十页，2022年，8月28日 复习参考题： 1、简述根培养的一般技术及其意义。 2、简述茎培养的一般技术及其意义。 3 、促进试管苗生根的措施？ 4、简述叶培养的一般技术及其意义。 第十页，共十页，2022年，8月28日