实验二类脂粒染色.pptxVIP

实验二类脂粒染色第1页/共12页 一、 实验材料实验菌株: 从SBR(Sequencing Barch Reactor Activated Sludge Process)反应器，经过1个月的厌氧好氧交替驯化，形成除磷能力很强的聚磷菌群。第2页/共12页 类脂粒染色原理细胞内含脂类储藏物的细菌。PHA聚羟基脂肪酸酯 ，在C/N高的环境中更易形成，用革兰氏染色不能使这类物质着色，被误认为是空胞。若用脂溶性染料染色，可将其与细胞内的空胞区别。第3页/共12页 类脂粒染色药品1）类脂粒染色液：染色液：0.3%苏丹黑染液0.3g苏丹黑，溶于100ml的75%酒精;褪色剂:二甲苯;复染剂：0.5%番红染液。第4页/共12页 操作步骤1.制片：涂片---干燥---固定；2.初染：在制片上滴0.3%苏丹黑染液，染10min，水洗，吸干；3.脱色：用二甲苯冲洗涂片至无黑色素洗脱；4.复染：用0.5%番红复染1-2min，水洗，吸干。5.镜检：类脂类呈蓝黑色，菌体其他部分呈红色；第5页/共12页 易染颗粒染色易染颗粒是细菌储藏的物质；主要是多聚磷酸盐，随着菌龄的增加而变大，易被蓝色燃料染色，而呈红色或紫色不呈现蓝色，故名易染颗粒，如用吕氏美兰单染5min，易染颗粒呈深蓝色，菌体呈淡蓝色，也称Albert易染颗粒染色法。第6页/共12页 易染颗粒染色药品甲液：甲苯胺蓝0.15g乙液：碘 2.0g，孔雀绿0.2g，KI3.0g，冰醋酸1ml溶于300ml，95%酒精。第7页/共12页 易染颗粒染色步骤1、滴甲液于涂片上染色5min，倾去；2、滴加乙液冲去甲液，再染1min，水洗。3、吸干、镜检。4、易染颗粒呈黑色，菌体呈绿色或浅绿色。第8页/共12页 第9页/共12页 类脂粒第10页/共12页 第11页/共12页 感谢您的欣赏第12页/共12页