实验五DMEM培养液的配制.pptxVIP

实验五DMEM培养液的配制;实验五 DMEM培养液的配制;500mL大烧杯 玻璃棒 250mL/500mL盐水 瓶 酸度计 50mL小烧杯3个 孔径0.22μm 微孔滤膜 一次性滤器 一次性滤纸 去离 子水 灭活的小牛血清 DMEM干粉 青霉 素 链霉素 NaHCO3 超净工作台 磁力搅 拌器 电子天平 药匙;第4页/共15页;DMEM干粉 1瓶(1,000mL量) NaHCO3 3.7g L-谷氨酰胺 0.2g 超纯水 1,000mL;取清洗干净的500mL大烧杯一个，加入 新鲜制备的三蒸水约300mL，加热至15~ 30℃； 将DMEM干粉袋竖立轻弹，使袋中粉下 沉，剪开袋口，将干粉倒入500mL的大烧 杯中，用超纯水冲洗袋2~3次； 放入清洗干净的磁子，在磁力搅拌器充 分搅拌，以确保培养基干粉充分溶解；;根据配方要求，加入准确称取的NaHCO3 1.85g，L-谷氨酰胺0.1g，充分摇匀至完全 溶解； 加入已经制备好的双抗溶液，使青霉素 和链霉素的最终使用浓度达到100μg/mL； 加入培养基总体积约10％的已灭活的小 牛血清；;用浓度为7.4％的NaHCO3溶液调整溶液 的pH值为7.2~7.4，加超纯水定容，并将 培养液转入盐水瓶； 用一次性滤器过滤上述培养液到灭菌的 盐水瓶，封口，4℃保存备用。;第9页/共15页;第10页/共15页;第11页/共15页;实验五 1M HCl的配制 1M NaOH的配制; 用5mL的移液器准确移取盐酸21mL， 加入到279mL超纯水中。;【课程安排】;感谢您的欣赏