食品中志贺氏菌的检验.pptxVIP

第1页/共66页食品中志贺氏菌的检验第2页/共66页志贺氏菌的检验一、实验目的了解志贺氏菌生物学特性及原理掌握志贺氏菌检验方法 第3页/共66页 检验志贺氏菌的方法很多，但食品卫生微生物检验具有法规性，检验必须采用国家标准规定的方法。近年来发展了许多快速检验的新方法，如技术等。我们下面介绍的方法即是国家标准规定的方法。要弄清检验原理，首先需要了解志贺氏菌的生物学特性。第4页/共66页志贺氏菌的检验二、志贺氏菌的生物学特性1、形态与染色：革兰氏阴性无芽胞杆菌，无荚膜，无鞭毛，不运动，有菌毛。革兰氏阴性鲍氏志贺菌第5页/共66页志贺氏菌的菌毛第6页/共66页志贺氏菌扫描电镜照片第7页/共66页志贺氏菌扫描电镜照片第8页/共66页志贺氏菌的透射电镜照片第9页/共66页二、志贺氏菌的生物学特性2、志贺氏菌的培养特性：需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2mm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，一般不形成沉淀，无菌膜形成。第10页/共66页菌落形态学关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。第11页/共66页弗氏志贺氏菌的菌落特征 第12页/共66页 宋内志贺菌乳糖迟发酵菌株在麦康凯平板上的菌落特征第13页/共66页第14页/共66页第15页/共66页第16页/共66页第17页/共66页第18页/共66页第19页/共66页细菌在肉汤培养基中的生长 第20页/共66页二、志贺氏菌的生物学特性3、志贺氏菌的生化特性： 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H2S。与肠杆菌科各属细菌相比较，志贺氏菌的主要鉴别特征为不运动，对各种糖的利用能力较差，并且在含糖的培养基内一般不形成可见气体。根据生化反应可进行初步分类。第21页/共66页不发酵乳糖和发酵乳糖菌落第22页/共66页二、志贺氏菌的生物学特性4、志贺氏菌的抗原构造与分型： 志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种：型特异性抗原、群特异性抗原、表面抗原（K抗原）。 根据抗原构造的不同，按必威体育精装版国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型（包括亚型）附：志贺氏菌抗原分类。第23页/共66页附:志贺氏菌抗原分类 抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种：型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时，此抗原也常随之消失，各菌型所含的型抗原不同，可用于区别菌种的型别。群特异性抗原：为光滑型菌株的次要抗原，也是菌体抗原的一种。特异性较低，常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中，由于所含群抗原不同，可将某些菌型分为多种亚型，如福氏菌2型，根据群抗原不同，可分成2a、2b两个亚型。表面抗原（K抗原）：在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热，加热100℃1小时即被破坏。具有此种抗原的菌株，可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝集。第24页/共66页志贺氏菌属的四个群 根据抗原构造的不同，按必威体育精装版国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型（包括亚型）A群：也称志贺氏菌群，有10个血清型。不发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶，与其他各群细菌无血清学联系。B群：也称福氏菌群，已有13个血清型（包括亚型和变种）。最近又发现3个亚型（1c、4c、5b）。发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。抗原结构较复杂，各型间有交叉凝集。每一福氏菌型具有二种抗原，即型特异性抗原和群抗原，前者只存在于同型菌株中，后者有许多种，存在于福氏各菌型中。例如福氏1b型除含有1型特异性抗原外，尚含有4、6群抗原。第25页/共66页C群：也称鲍氏菌群，有15个血清型，分解甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。各型内无交叉凝集。D群：也称宋内氏菌群，仅有一个血清型。分解甘露醇，有鸟氨酸脱羧酶，迟缓发酵乳糖。有Ⅰ(S相光滑菌落)、Ⅱ相(R粗糙菌落)之分。第26页/共66页 福氏志贺菌在HE琼脂平板上的菌落特征蓝绿色大肠埃希菌红色较大第27页/共66页二、志贺氏菌的生物学特性5、志贺氏菌的抵抗力：志贺氏菌属与沙门氏菌属及其他肠道杆菌相比，对理化因素抵抗力较低，对酸较敏感，必须使用含有缓冲剂的培养基。在外界环境中的生存力，以宋内氏最强，福氏菌次之，痢疾志贺氏菌最弱。一般在潮湿土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在粪便内（室温）存活11天。日光直接照射30分钟，56-60℃10分即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1%石炭