DB6501T 044-2023动物源肺炎克雷伯菌检验.docx

ICS 11.220 CCS B 41 6501 乌 鲁 木 齐 市 地 方 标 准 DB 6501/T 044—2023 动物源肺炎克雷伯菌检验 Examination of Klebsiella pneumoniae of animal origin 2023 - 05 - 25 发布 2023 - 06-01 实施 乌鲁木齐市市场监督管理局 发 布 目 次 前言 III 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 设备和材料 1 5 培养基和试剂 2 5. 1 要求 2 5.2 培养基 2 5.3 试剂 2 6 标准菌株 2 7 生物安全要求 3 8 样品采集与保存运输 3 8. 1 鼻拭子、直肠/泄殖腔拭子 3 8.2 生鲜乳样品 3 8.3 组织样品 3 9 检验程序 3 10 增菌 4 11 分离纯化 4 12 革兰氏染色镜检 4 13 鉴定 4 13.1 生化鉴定 4 13.2 质谱鉴定 5 13.3 PCR 鉴定 5 14 结果与报告 6 15 菌株保藏 6 附录 A（规范性） 培养基和试剂 7 A.1 营养肉汤（NB） 7 A.2 麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂（MIAC） 7 A.3 营养琼脂（NA） 7 A.5 羧苄青霉素 8 A.6 氧化酶试验试剂 8 A.7 无菌 0.85 %生理盐水 8 A.8 5%蔗糖脱脂乳保护剂 8 附录 B（资料性） 肺炎克雷伯菌 Khe 基因 PCR 扩增目标片段测序序列......................... 10 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分： 标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心提出。 本文件由乌鲁木齐市农业农村局（乌鲁木齐市乡村振兴局）归口并组织实施。 本文件起草单位：乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、新疆农业大学动物医学学院、新疆畜牧科 学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）、乌鲁木齐市疾病预防控制中心、新疆农业 科学院农业质量标准与检测技术研究所、乌鲁木齐市米东区畜牧兽医站、乌鲁木齐市米东区三道坝镇农 业畜牧业发展服务中心、乌鲁木齐县畜牧兽医站、乌鲁木齐市达坂城区畜牧兽医站、新疆中科基因科技 有限公司。 本文件主要起草人： 蔡扩军、夏俊、陈国利、赵红琼、王兵、徐敏、王涛、杨毅、韩海燕、吴星星、 任皓、贾立敏、周继萍、尚月梅、杨艳梅、马佳妮、马卫平、李建玲、李兆新、姜玉婷、王六合、吾斯 曼·吾曼尔、赵艳坤、陈贺、彭华刚、方新元、贾伟、帕提玛?努合曼、李丽、陈懿、马晓燕、赵文年、 齐姗姗、宋震宇、赵春山。 本文件实施应用中的疑问，请咨询乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心。 对本文件的修改意见建议，请反馈至乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心（乌鲁木齐市南湖西路15 号）。 乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心 联系电话：0991-4643100；传真：0991-4668587；邮编：830063 动物源肺炎克雷伯菌检验 1 范围 本文件规定了动物源肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）检验的设备和材料、培养基和试剂、 标准菌株、生物安全要求、样品采集与保存运输、检验程序、增菌、分离纯化、革兰氏染色镜检、鉴定、 结果与报告、菌株保藏等技术要求。 本文件适用于动物鼻拭子、直肠/泄殖腔拭子、生鲜乳、组织等样品中肺炎克雷伯菌的检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件； 不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3 .1 肺炎克雷伯菌 Klebsiella pneumoniae 肺炎克雷伯菌属肠杆菌科克雷伯氏菌属， 为革兰氏染色阴性的粗短杆菌，大小0.5 μm～0.8 μm×1 μm～2 μm,单个、成双或短链状排列，无芽胞，无鞭毛，不运动，有明显荚膜。该菌广泛存在于自然界、 人和动物的肠道、上呼吸道， 是重要的人畜共患条件性致病菌，耐药性较强，可引起肺炎