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基因工程根据汉水丑生老师思路;;第3页/共70页;;一、DNA重组技术的基本工具;1、限制酶 识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。; ;限制酶切割的是什么?;第9页/共70页;第10页/共70页;第11页/共70页;第12页/共70页;;第14页/共70页;第15页/共70页;第16页/共70页;第17页/共70页;基因工程的基本操作程序;;(一)从基因文库中获取目的基因;第21页/共70页;第22页/共70页;基因组文库和部分基因文库的比较;;基因组文库和部分基因文库的比较;(二)利用PCR技术扩增目的基因;;;;;;;a、DNA变性(90℃-95℃):双链DNA模板 在热作用下,_____断裂,形成___________;PCR技术扩增与DNA复制的比较;基因较小,核苷酸序列已知,可以利用DNA合成仪人工合成 ;;表达载体; 用一定的_________切割 质粒,使其出现一个切 口,露出____________。 用_____________切断目 的基因,使其产生_____ ____________。;注意:载体与表达载体的区别 二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构;;农杆菌转化法 ;基因枪法:目的基因导入单子叶植物细胞;;;;;;DNA分子杂交技术;;DNA分子杂交技术;;;;第54页/共70页;;(2)抗病转基因植物 抗病转基因植物所用的基因: ①常用:病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因 ②抗真菌转基因植物中有:几丁质酶基因和抗毒素合成基因 (3)其它抗逆转基因植物 ①抗盐碱、干旱的基因:调节细胞渗透压的基因 ②抗冻蛋白基因 ③抗除草剂基因 ;2、改良农作物的品质;;(二)用于改善畜产品的品质;将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,将受精卵送入母体,使其发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。;①获取目的基因(例如血清白蛋白基因) ②构建基因表达载体(在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子) ③显微注射导入哺乳动物受精卵中 ④形成胚胎 ⑤将胚胎移植入母体动物 ⑥发育成转基因动物(只有在产下的雌性个体的乳腺细胞中,转???的基因才能特异表达)。;(四)用转基因动物作器官移植的供体;;;DNA分子杂交是基因诊断最基本的方法之一。当用一段已知基因的核苷酸序列作为探针,与被测基因进行接触,若两者的碱基完全配对成双链,则表明被测基因中含有已知的基因序列。;;;蛋白质工程的概念;比较项目;感谢观看!

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