未知肠道杆菌的分离鉴定程序.pptxVIP

未知肠道杆菌的分离鉴定程序;标本;标本中未知病原性球菌的分离鉴定程序 ; 直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板 涂片、染色、镜检 挑取可疑菌落 生化反应测定 纯培养 致病性测定 （凝固酶、耐热核酸酶）;设计性实验;设计性实验;3.尿 标本：尿液 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等 4.粪便 标本：肛门拭子 培养基：伊红美兰琼脂平板、克氏双糖铁斜面培养基、 动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基 其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺 菌多价血清、玻片等 ;;;;;1. EMB平板（伊红美蓝琼脂培养基） 组成：无糖培养基＋乳糖＋伊红＋美蓝 底物 指示剂、抑菌剂 原理： 细菌 乳糖 产酸：伊红＋美蓝 紫黑/紫红 结果： 分解乳糖细菌 菌落变黑，有金属光泽 不分解乳糖细菌 菌落无色、半透明（粉色）;EMB agar;2. 靛基质试验（吲哚试验） 组成：蛋白胨水＋色氨酸 原理： 分解 某些细菌有色氨酸酶 色氨酸 吲哚（无色）＋柯氏 试剂 玫瑰吲哚（红色） 结果：液面形成玫瑰红色 ;吲哚试验;3. 克氏双糖铁斜面培养基反应试验 组成：无糖培基＋1份葡萄糖＋10份乳糖＋铁盐＋酚红 营养 底物 底物 底物 指示剂 原理： 只分解葡萄糖 产酸（葡萄糖少，产酸量少） 分解葡萄糖＋乳糖 产酸（乳糖多，产酸多） 上下层均为黄色 产生H2S＋铁盐 FeS 培养基成黑色 ;Double suger iron slant;4. 尿素培养基 组成：基础培基＋尿素＋酚红 底物 指示剂 原理： 有些细菌产生尿素酶 分解尿素 产氨 结果： 分解尿素 培基变红 不分解尿素 培基不变色 ;Urea slant;肥达试验(4人/组);; 1 2 3 4 5 6 NS（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 未知血清 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 (1:10) 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 菌液(摇匀) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 (4种，1种/人) 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 (阴性对照) 37℃水浴过夜;肥达试验;以呈现＋＋凝集的血清最高稀释度作为该血清的凝集效价 1 2 3 4 5 6 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 对照 O ++++ ++ ++ - - - H ++++ +++ ++ ++ - - PAH ++ + - - - - PBH + - - - - - ;肥达反应;肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集