绒山羊BAC文库的构建与鉴定以及绒毛生长发育相关基因的筛选的开题报告.docx

绒山羊BAC文库的构建与鉴定以及绒毛生长发育相关基因的筛选的开题报告 一、研究背景和意义： 绒山羊毛皮厚实柔软，被誉为“活羊毛绒”，具有很高的经济价值，因此被广泛养殖。然而，绒山羊在毛发生长和发育方面的关键调控机制仍未完全阐明。克隆与鉴定绒山羊BAC文库并筛选出与绒毛生长发育相关基因，对进一步了解绒山羊毛发的形成机制、剖析毛生长发育的分子调控机制，以及高效的繁殖和培育优良优种等方面都具有重要意义。 二、研究内容 1. 绒山羊BAC文库构建与鉴定 利用常用的双水平凝胶电泳法和常规的DNA制备技术，构建绒山羊的BAC文库，并通过筛选和鉴定，评估所构建的BAC文库的质量和稳定性，为后续的基因克隆与研究提供基础支持。 2. 绒山羊毛发生长发育相关基因的筛选 通过BLAST比对数据库与候选基因的序列，根据绒山羊的生物学特征和表型，在BAC文库中针对与绒山羊毛发生长发育相关的分子标记进行深入分析、序列筛选以及功能分析，从而挖掘出一些新的关键性基因并对其进行深入研究。 三、研究方法： 1. BAC文库的构建方法 利用常用的双水平凝胶电泳法在Agrobacterium tumefaciens BV3100细胞中构建含有大小为100-300 kb的绒山羊BAC DNA的文库。该方法利用高分辨率的PFGE技术，保证构建的BAC文库的大小分布范围窄并且文库质量高。 2. BAC文库的鉴定方法 采用南方杂交法、PCR等方法，对文库中的BAC片段进行鉴定。并对文库的大片段进行消除内源性半胱氨酰酸（CHX）处理，以便进行后续的筛选和序列分析。 3. 基因筛选方法 采用RT-PCR等方法对BAC文库中的基因进行筛选和鉴定。根据绒山羊毛发生长发育的相关基因在其他物种中的函数和表达调节机制，以及与毛发发育和生长相关的生物学特征，对候选基因进行深入比对和筛选。 四、短期目标： 1. 完成绒山羊BAC文库的构建以及鉴定。 2. 对文库中的20个随机基因进行筛选和鉴定，了解绒山羊毛发生长发育相关的基因的分布范围和序列特征。 三、长期目标： 1. 深入分析筛选的绒山羊毛发生长发育相关基因，重点挖掘关键性功能基因，研究背后的分子机制和信号传递途径。 2. 探索绒山羊毛发生长发育的分子调控机制，为后续育种改良、优良选种、毛发生产等方面的研究和开发提供理论支撑和基础数据。