DB37_T 3498-2019谷类作物籽粒植酸含量测定方法.pdf

ICS65. 020B 01DB37山東东省地方标准DB37/T3498—2019谷类作物籽粒植酸含量测定方法Determination of phytic acid in cereal grains2019-01-29发布2019-03-01实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 3498—2019目次前言111范围.2规范性引用文件3原理，4试剂和材料，5仪器设备，6试样制备，7分析步骤7.1试样提取7.2标准曲线制作7.3试样测定8分析结果的表述9精密度 DB37/T 3498—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省农业农村厅提出并监督实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院玉米研究所、山东省农业科学院作物研究所、山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：薛艳芳、季宗新、张慧、高英波、钱欣、刘开吕、齐世军、张丙春、夏海勇、王竹。II DB37/T 3498—2019谷类作物籽粒植酸含量测定方法1范围本标准规定了谷类作物粒包括全籽粒粉、胚、胚乳、种皮等组织中植酸含量的测定方法本标准适用于谷类作物粒中植酸含量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理硫酸铁铵与双吡啶-殖基乙酸溶液反应生成一种粉红色的物质，在波长519nm处吸光度最强。当植酸存在时，铁与磷酸酯结合，故而不能与双吡啶-疏基乙酸溶液反应，致使粉红色消退，吸光度的下降与植酸的浓度成反比，进而通过测定显色反应的吸光度值，计算试样植酸含量。试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯或以上的试剂，水为GB/T6682规定的三级水。4. 1盐酸（HC1）4. 2硫酸铁铵[FeNH,(SO,)·12H;,0]。4. 3双吡啶(CH,Nz,优级纯）4. 4巯基乙酸（CHO,S，优级纯），4.5植酸钾标准品（CHsK:0:Ps，CAS号：129832-03-7），纯度99%。4. 6盐酸落液（0.2mo1/L）：量取17.2mL盐酸，用水定容至1000mL4.7盐酸落液（2mo1/L）：量取17.2ml盐酸，用水定容至100mL4.8硫酸铁铵溶液（0.02%）：称取0.20g硫酸铁铵溶于100nL2mo1/L盐酸溶液（4.7）溶解，用水定容至1000ml。4.9双吡啶-疏基乙酸溶液（1%）：称取10.00g双吡啶，加10mL殖基乙酸湿润、溶解，用水定容至1000ml，播勺。4C烂存，有效期2个月4. 10植酸钾标准落液（1.30mg/mL）：准确称取0.13g（确定至0.0001g）植酸钾（4.5），落解后定容至100mL.5仪器设备5.1可见分光光度计：带519nm1 DB37/T 3498—20195.2天平：感量0.01 g和0.0001g-5.3离心机:200 r/min5.4振荡器。5.5水浴锅。5.6粉碎机。6试样制备取经充分混勾的代表性样品不少于500g，通风处自然风干或50C烘干后，用粉碎机粉碎，过40目筛，混匀后储于塑科瓶或玻璃瓶保存备用，.分析步骤7. 1试样提取称取经50℃烘箱内烘5h~8h的全籽粒粉0.05g~~0.1g、胚或种皮0.02g~~0.03g或纯胚乳粉0.2g~~0.3g，均精确至0.0001g，于50mL塑料瓶中，分别加入0.2mo1/L盐酸溶液10ml（4.6），加盖旋紧后的塑料瓶室温振荡提取2h，转速200r/min，或不振荡4℃C静置过夜。7.2标准曲线制作依次准确移取标准溶液（4.10）0.1ml、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL、0.6 mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL和1.0mL于10支15mL试管中，依次分别加入0.2mo1/L盐酸落液（4.6）至10mL，配制成含有粗酸磷3.3 ug/mL、6.6 ug/mL、9.9 ug/mL、13.2 ug/mL、16.5 ug/mL、19.8 ug/mL、23.1 ug/mL、26.4ug/mL、29.7ug/mL和33.0ug/mL的标准系列溶液。混匀后，分别移取0.5mL上清液，加1mL0.02%硫酸铁铵溶液（4.8），置于试管架上入沸水溶保温30min，取出后以流动水冷却至室温，分别加2ml1%双吡啶-疏基乙酸落液（4.9），混匀后，立即倒入1cm比色Ⅲ中，于519nm波长下测定吸光度，用水作为参比落液，以吸光度为级坐标，植酸磷含量为模坐标，制作标准曲线，7. 3试样测定标准系列溶液测定完成后，分别移取0.5mL试样提取上清液（7.1），按照上述操作