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病毒滴度测定及结果 本实验测定滴度最高为1×104cfu/mL 当前第30页\共有74页\编于星期四\8点 胃癌细胞tk基因的斑点杂交鉴定 1 2 3 胃癌细胞SGC-7901、SGC-7901/tk的 DNA 与tk探针的斑点杂交图 注:1. pLXSN/ tk 质粒DNA(阳性对照); 2. SGC-7901细胞DNA; 3. SGC-7901/tk细胞DNA 当前第31页\共有74页\编于星期四\8点 GCV对人胃癌细胞SGC-7901的体外杀伤试验 当前第32页\共有74页\编于星期四\8点 结论及意义 已成功已成功构建了逆转录病毒载体介导的HSV-tk/GCV肿瘤自杀基因治疗系统 HSV- tk/GCV自杀基因治疗系统成功的构建,为后续的研究工作奠定了坚实的基础 当前第33页\共有74页\编于星期四\8点 中药方药对肿瘤自杀基因治疗的增效作用 当前第34页\共有74页\编于星期四\8点 动物水平实验 当前第35页\共有74页\编于星期四\8点 技术路线 H22/tk+和H22/tk-按1∶4混合 接种小鼠皮下组织 ( 2×106细胞 ) 病毒感染肝癌细胞 疗效观察 动物分组 GCV体外杀伤试验 成瘤后治疗 小鼠移植性肝细胞癌治疗实验(六味地黄) 当前第36页\共有74页\编于星期四\8点 分组及治疗 模型对照组 正常对照组 联合治疗组 六味地黄丸治疗组 自杀基因治疗组 (造模) 第2天 第6天 第16天 蒸馏水灌胃每天0.5mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 蒸馏水灌胃每天0.5mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 腹腔注射生理盐水每天0.25mL 腹腔注射GCV100mg﹒kg-1﹒d-1 腹腔注射GCV100mg﹒kg-1﹒d-1 六味地黄丸悬液灌胃10g﹒kg-1﹒d-1 蒸馏水灌胃每天0.5mL 六味地黄丸悬液灌胃10g﹒kg-1﹒d-1 (造模) (造模) (造模) (生理盐水) 当前第37页\共有74页\编于星期四\8点 肿瘤生长体积曲线 时间(d) 当前第38页\共有74页\编于星期四\8点 肿瘤质量及抑瘤率 组别 n 肿瘤质量(g) 抑瘤率(%) 模型对照组 19 1.5825±1.2380 六味地黄治疗组 19 0.8498±0.7163 46.3 自杀基因治疗组 20 0.9904±0.9796 37.4 联合治疗组 18 0.5859±0.3786* 63.0 注:*与模型对照组比较P0.05 抑瘤率=(模型组肿瘤质量-治疗组肿瘤质量)/模型组肿瘤质量×100% 当前第39页\共有74页\编于星期四\8点 肿瘤质量图示 当前第40页\共有74页\编于星期四\8点 病理检查结果(肉眼观察) 注:第二组:肿瘤模型组;第三组:六味地黄丸治疗组;第四组:自杀基因治疗组; 第五组:联合治疗组 当前第41页\共有74页\编于星期四\8点 病理检查结果(光镜观察 ) 模型对照组 肿瘤细胞数量较多,密集。 六味地黄丸治疗组 肿瘤细胞数量较多,密集。 自杀基因治疗组 肿瘤细胞数量密度相对较少。 联合治疗组 肿瘤细胞数量密度相对较低。 各组细胞密度 当前第42页\共有74页\编于星期四\8点 模型对照组:肿瘤组织内肿瘤细胞坏死,呈核固缩表现,并见大片红染无结构的坏死组织 六味地黄丸治疗组:肿瘤组织内肿瘤细胞坏死,呈核固缩表现,并见大片红染无结构的坏死组织 自杀基因治疗组:肿瘤组织内肿瘤细胞坏死,呈核固缩表现,并见大片红染无结构的坏死组织 联合治疗组:肿瘤组织内肿瘤细胞坏死,呈核固缩表现,并见大片红染无结构的坏死组织。 各组肿瘤坏死情况 当前第43页\共有74页\编于星期四\8点 模型对照组:肿瘤周边纤维组织增生不明显,未见明显包膜 六味地黄丸治疗组:肿瘤周边纤维组织增生较明显,形成较明显的假包膜 自杀基因治疗组:肿瘤周边纤维组织增生较明显,形成较明显的假包膜 联合治疗组:肿瘤周边纤维组织增生较明显,形成较厚的假包膜 各组肿瘤纤维结缔组织增生情况 当前第44页\共有74页\编于星期四\8点 模型对照组:肿瘤边缘见少量炎细胞浸润 六味地黄丸治疗组:肿瘤边缘纤维结缔组织内见较多量炎细胞浸润 自杀基因治疗组:肿瘤边缘纤维结缔组织内见较多量炎细胞浸润 联合治疗组:肿瘤边缘纤维结缔组织内见大量炎细胞浸润 各组肿瘤组织炎细胞浸润情况 当前第45页\共有74页\编于星期四\8点 肝癌治疗实验结论
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