DB37_T 2820-2016玉米茎腐病鉴定技术规范.pdf

ICS 65. 020B 01DB37山長东省地電方标准DB37/T2820—2016玉米茎腐病鉴定技术规范2016-07-29发布2016-08-29实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 2820—2016前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由山东省农业厅提出。本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院玉米研究所、山东省农业科学院植物保护研究所、山东农业大学、山东省标准化研究院。本标准主要起草人：贾曦、李长松、田延平、王璐、刘振林、张悦丽、李宗新、穆春华、杨菲、王鹏.本标准为首次发布。I DB37/T 2820—2016玉米茎腐病鉴定技术规范1范围本标准规定了山东省玉米茎腐病鉴定方法。本标准适用于山东省玉米茎腐病田间和实验室鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1玉米茎腐病Corn stalk rot玉米茎属病是由多种病原菌单独或复合侵染引起的根系、茎基部和茎杆一类土传病害总称，主要包括青枯型和黄桔型两种。病原菌为瓜果属霉[Pyt/dert（Eds）Fitzp」和未谷刀菌(Fusariuw grasinearuw Schwabe) .3茎属病由间症状鉴定玉米进入灌浆至乳熟期时，全株叶片突然快速失绿褪色，无光泽，似水烫，2d3d叶片呈现为青灰色干枯并下垂，植株直立不倒伏，但在23周后出现倒伏。植株近地表的13茎节表皮失绿，逐渐变为褐色并失去硬度，内部茎髓组织分解变空，严重时发病茎节产生缢缩，茎秆易发生倒折：根系呈黑褐色，逐渐腐烂，植株易被拔起：雌穗穗柄部变软，雌穗倒挂，植株早衰。3.1青枯型症状青枯型也称急性型，发病后叶片自下而上迅速枯死，呈灰绿色，水烫状或霜打状，该类型主要由瓜果腐霉菌为主侵染引起。3.2黄枯型症状黄枯型也称慢性型，发病后叶片自下而上遂渐黄枯，该症状类型主要由未容镰刀菌为主侵染引起4茎属病病原形态鉴定4.1PDA培养基马铃薯去皮切片，称取200g，加1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，加补蒸留水至1000mL加20g琼脂粉，加热落化后，再加入葡萄糖20g，揽拌均匀并落化后，于121C高压灭菌30min。4.2病原分离在无菌条件下，将病样茎基部23节直接剖茎，挖取2~3节部位髓组织0.3cm~0.5cm见方的小块，每个增养皿放4块，在PDA培养基上，塔养2d7d后得到初分离物，并及时纯化。 DB37/T 2820—20164.3分离物鉴定参见附录A和B。病原分离物致病性鉴定5.1原理根据科赫（Koch）法则，将病原分离物在与病样同品种玉米灌浆初期进行回接，验证其是否为玉米茎屑病致病菌。5.2接种方法将玉米粒漫泡12h，煮沸1h，121℃高温高压灭菌2h，制作成玉米粒培养基。将病原分离物分别在玉米粒培养基上扩繁得到玉米粒菌剂，在玉米灌浆初期进行土壤接种。5.3结果调查与分析玉米乳熟后期进行调查，出现4.1.1所表述的青枯型症状及4.1.2表述的黄枯型整状均可判定，分离物中含有玉米茎腐病致病菌。2 DB37/T 2820—2016附录A（资料性附录）瓜果腐霉病原菌A.1学名瓜果腐霉（Paphanidermtum(Edson）Fitzpatrick）为卵菌门腐莓目腐霉科腐霉属的一类真菌。A.2形态描述病原菌在PDA培养基生长为放射状，气生菌丝绵累状。菌丝发达，分枝繁茂，菌丝粗2.8um～9.8jll.抱子囊为影大菌丝或瓣状菌丝、不规则菌丝组成，顶生或间生，大小为63735um×4.9~22.6m：出管长短不一，粗约4.2Ⅲ；泡囊球形，内含6～25个或更多的游动孢子；游动孢子肾形，侧生双鞭毛，长13.7~17.2mX12.0~~17.2m；休止孢子球形，直径11.2~12.1m。藏卵器球形，平滑，多顶生，偶有间生，柄较直，直径1726m。雄器袋状、宽棍棒状或屋顶状、玉米粒状或慧状，间生或顶生，同丝生或异丝生，每一藏卵器有1~2个雄器，授精管明显，11.6~~16.9m×10.0～12.3m，平均13.97×11.28m。卵孢子球形，平滑，不满器，直径19~22m，壁厚2.3~3.1ll注：左图为菌落正面，右图为菌落背面图A.1瓜果腐霉培养性状图A.2瓜果腐霉孢子囊和卵孢子 DB37/T 2820—2016附录B（资料性附录）禾谷镰刀病原菌B. 1未谷镶刀菌（FusariwgraineawSchwabe）文称禾谷镰孢菌，属半知菌亚门真菌B.2形态描述在PDA培养基上产生不均勾的絮状菌丝，菌丝颜色从粉红色到淡橘黄色或玫瑰红色，在培养基背面产生玫瑰红到暗红色色素，分生孢子形态特征：大型分生孢子镰刀形，PDA培养基上极少，绿豆汤培养基上多，孢子较大，顶部细胞渐尖或模形，基胞足跟明显，37分隔，小型分生孢子偶尔可见，椭圆形。无厚垣孢子，单