YC_T 381-2010烟草及烟草制品 葡萄糖、果糖、蔗糖的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65. 160X 85.备案号：30438--2011中华人民共和国烟草行业标准YC/T 381—2010烟草及烟草制品葡萄糖、果糖、蔗糖的测定高效液相色谱法Tobacco and tobacco products-Determination of glucose, fructose and sucrose-High performance liguid chromatographic method2011-01-15实施2010-12-27 发布国家烟草专卖局发布 YC/T 381—2010前言本标准按照GB/T 1.1一2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》和GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SAC/TC144/SC1)归口。本标准起草单位：广东中烟工业有限责任公司、湖南中烟工业有限责任公司、中国烟草总公司郑州烟草研究院、中国烟草标准化研究中心、甘肃烟草工业有限责任公司。本标准主要起草人：黄翼飞、袁庆钊、黄菲、胡静、胡念念、颜权平、度苏行、张晓兵、吴君章、韩云辉、翟玉俊、戴云辉、纪庆升、胡斌、施文庄。 YC/T 381—2010烟草及烟草制品葡萄糖、果糖、蔗糖的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了烟草及烟草制品中葡萄糖、果糖、蔗糖的高效液相色谱测定方法。本标准适用于烟草及烟草制品中葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。本方法测定烟草及烟草制品中葡萄糖、果糖、蔗糖含量的检出限分别为0.005%、0.006%和0.002%，定量限分别为0.016%、0.020%和0.007%。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法YC/T31烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3原理用0.01 mol/L氢氧化钠溶液提取试样中的葡萄糖、果糖和蔗糖，通过阳离子交换色谱分离，使用示差折光检测器分析。4试剂与材料除特别要求以外，均应使用分析纯试剂，水应符合GB/T6682中一级水的规定。4.1 葡萄糖(≥99.0%)。4.2 果糖(≥99.0%)。4.3 蔗糖(≥99.0%)。4.4氢氧化钠。4.5萃取溶液:0.01 mol/L氢氧化钠。4.60.45 μm水相滤膜。4.7标准溶液4.7.1混合标准储备液分别准确称取0.25g葡萄糖（4.1)、0.25g果糖（4.2）、0.20g蔗糖（4.3），精确至0.0001g，用萃取溶液（4.5)溶解后转人100 mL容量瓶中，并用萃取溶液（4.5)定容至刻度，配制成葡萄糖、果糖和蔗糖含量分别为2 500 μg/mL、2500 μg/mL和 2000 μg/mL的混合标准储备液。本储备液应在0℃～4℃条件下贮存,并应在两周内使用。4.7.2混合标准工作溶液分别移取一定体积的混合标准储备液(4.7.1），用萃取溶液（4.5)稀释定容。根据需要，配制合适浓1 YC/T 381—2010度的混合标准工作溶液待用。推荐按表1配制混合标准工作溶液系列。表1 混合标准工作溶液系列单位为微克每毫升序号果糖葡萄糖燕糖12 5002 5002 00021 0001 000800850050040042002001605505040610 1085仪器及条件5.1旋风式样品磨粉机。5.2分析天平,感量 0.0001 g。5.3振荡器。以下色谱分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性：色谱柱：:300 mm × 7.8 mm i.d.，填料为 Pb2+型磺化苯乙烯-二乙烯苯(SDVB)树脂，推荐使用同样填料的保护柱；柱温:80℃;流动相：水;流速:0.4 mL/min;检测池温度：40℃；进样量：20 μL;样品运行时间：40 min。6分析步骤6.1试样制备按YC/T31制备试样并测定水分含量。6.2　萃取称取 1g试样,精确至 0.0001g，置于 100mL三角瓶中,加人 50mL萃取溶液(4.5），具塞振荡萃取 60 min,经 0.45 μm 水相滤膜（4.6)过滤后待分析。6.3标准工作曲线的制作对混合标准工作溶液(4.7.2)进行色谱测定，由保留时间定性，外标法定量。根据混合标准工作溶液各组分的浓度以及对应组分的响应峰面积，建立线性回归方程，相关系数应大于0.999。2 YC/T 381---2010混合标准工作溶液和样品溶液色谱图参见附录A。6.4样品测定按照仪器测试条件测定试样（6.2），每个样品平行测