GAT 819-2009蛋白质纤维上酸性染料的分析方法.pdf

ICS_13. 310GAA 92中华人民共和国公共安全行业标准GA/T 819-—2009蛋白质纤维上酸性染料的分析方法Analytical method of acid dyes on the protein fibers2009-02-25发布2009-03-01实施中华人民共和国公安部发布 GA/T 8192009前言本标准由全国刑事技术标准化技术委员会理化检验标准化分技术委员会（SAC/TC179/SC4）提出并归口。本标准起草单位：中国刑事警察学院本标准主要起草人：王景翰。1 GA/T 819--2009蛋白质纤维上酸性染料的分析方法1范围本标准规定了蛋白质纤维上酸性染料的提取和检验方法。本标准适用于刑事技术理化物证检验中蛋白质纤维上酸性染料的检验。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GA/T 242微量物证的理论检验术语3 术语和定义GA/T 242 中确立的术语和定义适用于本标准。4蛋白质纤维上染料的提取4. 1 试剂N,N-二甲基甲酰胺(DMF),甲酸,均为分析纯试剂。4.2提取4.2.1微型提取器法在 5 mL 的烧杯中加人 3 mL DMF 溶剂,将长约 2 cm 的涤纶纤维置于烧杯中浸泡 5 m1n,然后用小镊子夹出，放人微型提取器的样品池中。取 1 mL DMF-甲酸(1：1,V/V)溶剂,置于提取管内的样品池中，加热1 min～2 m1n至沸腾，待纤维褪色或呈无色时停止加热。冷却后，取出纤维，将样品池中有色提取液置于1 mL试管或点滴板上，待色谱法测定。微型提取器由样品池、冷凝管、排气孔和提取管四部分组成，结构如图1所示。A排气孔冷凝管样品池提取管图1微型提取器的结构4.2.2毛细管法将样品放入一端封闭的毛细管(内径约 1 mm)中,加人 5 μL DMF-甲酸(1：1,V/V)溶剂,将毛细管另一端封闭。于烘箱内 120℃恒温 20 mn,冷却后取出。使用时将一端锉开取出提取液，1 GA/T 819---20095高效液相色谱法(HPLC)测定5. 1 试剂与标准溶液5. 1.1 试剂HPLC测定蛋白质纤维上酸性染料需要下列试剂：a）DMF、甲酸、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠溶液(0.005 mol/L)、磷酸四丁基铵溶液(0.003 mol/L)，以上试剂均为分析纯；b）甲醇(色谱纯);c）商品染料莱纳晒脱 B。5. 1. 2 标准溶液莱纳晒脱 B标准品溶液:取少许（约 0.1 μg)莱纳晒脱 B 置于 1 mL玻璃试管中,加人 0.5 mLDMF-甲酸(1：1,V/V)溶剂。5.2仪器高效液相色谱仪（紫外-可见检测器）。5.3 高效液相色谱参考条件5.3.1色谱柱色谱柱选择 C18柱。5.3.2流动相流动相可采用甲醇-水（80：20,V/V)溶液，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠（0.005mol/L，pH6.4），磷酸四丁基铵(0.003 mol/L)。5.3.3检测波长检测波长设为 400 nm～700 nm。5.3.4流速流速可选择 1 mL/min。5.3.5 进样量进样量一般在 5 μL。5. 4 检测将染料提取液按5.3的分析条件进行测定，得到色谱图。5.5精密度重复测定 5 次～7 次,相对峰高或峰面积的相对标准偏差(RSD)不大于 15%。5.6结果处理计算色谱图上各色谱峰的峰高或峰面积。根据色谱峰的数目、保留时间和相对峰高或峰面积比进行检材和比对样品的比对分析。6薄层色谱法测定6.1 试剂和标准溶液6.1.1 试剂薄层色谱法测定蛋白质纤维上酸性染料需要下列试剂：a）DMF、环已烷、乙酸乙酯、冰乙酸、甲醇、硅胶 G、羧甲基纤维素(CMC),试剂均为分析纯;b）商品染料酸性媒介棕RH。6. 1.2 标准溶液酸性媒介棕 RH 标准溶液：取少许（约 0.1 μg)酸性媒介棕 RH 置于 1 mL玻璃试管中，加入0.5 mL DMF-甲酸(1 :1.V/V)溶剂。2 GA/T 819—20096.2仪器薄层色谱法测定蛋白质纤维上酸性染料需要下列仪器：a）毛细管；b）层析缸；点滴板;d）电吹风; (a玻璃板或薄层板。6.3测定方法6.3.1薄层板的准备硅胶G羧甲基纤维素薄层板可自行制备，也可直接购买。使用前放入烘箱中100 ℃下恒温30 min，冷却后取出，置于干燥器中备用。6.3.2配制展开剂将乙酸乙酯-冰乙酸-水(50：15：10,V/V)溶剂按比例量取后，置于层析缸中混合均匀,加盖，放置30 min.6.3.3点样和展开将染料提取液及酸性媒介棕RH标准溶液，用毛