DB37_T 2356-2013芋头脱毒快繁生产技术规程.pdf

ICS 65. 020. 20B 05DB37山東东省地電方标准DB37/T2356—2013芋头脱毒快繁生产技术规布2013-07-10实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T 言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业技术推广总站、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、鲁东大学、青岛农业大学，本标准主要起草人：沈锅、蒋晓满、高中强、李庆典、李锡香、王海平、郝国芳、退新之、刘国琴、丁习武。I DB37/T 2356—2013芋头脱毒快繁生产技术规程1范围本标准规定了芋头脱毒快繁的术语和定义、质量要求、脱毒苗快繁技术、种芋繁有技术、包装、贮藏和运输以及生产档案本标准适用于山东省芋头脱毒苗的快速繁殖和生产，其他地区可参考使用。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件，NY/T394绿色食品肥料使用准则NY 5010无公害食品蔬菜产地环境条件3术语和定义下列术语和定义适用于本文件，3. 1脱毒在无菌操作的条件下，经过茎尖生长点培养脱去芋头花叶病毒，3. 2脱毒组培苗简称脱毒苗，指经过茎尖测离脱毒、组织培养后，经检测确认不带芋头花叶病毒的种苗。3. 3脱毒种芋由脱毒组培苗、脱毒芋头原原种、脱毒芋头原种生产的种芋。3. 4脱毒芋头原原种在良好隔离条件下，由脱毒苗生产的符合质量标准的种芋，3. 5脱毒芋头原种 DB37/T 2356—2013脱毒芋头原原种在良好隔离条件下生产的符合质量标准的种芋，3. 6脱毒芋头生产用种脱毒芋头原种在1kl范围内无天南星科植物的条件下生产的种芋。质量要求脱毒芋头质量应符合以下各项要求：a)品种纯度不低于99%：b)原原种脱毒率100%，原种脱毒率≥98%，生产用种脱毒率≥95%：c)植株芋头软腐病、芋头疫病带病率为0：生产单个球茎质量不低于15g：e)无明显机械伤，项芽完好：f)新鲜、无萎燕、无腐烂：g)萌发率不低于90%5脱毒苗快繁技术5.1脱毒苗的培育5.1.1外植体准备选无病虫为害、饱满充实的芋头球茎的顶芽，置25℃条件下催芽，萌发后的项芽作为剥离材料。5.1.2分化培养基的制备分化培养基：MS+6-BA1.0mg，NAA0.2mg，精胺20mg，分装入管（瓶）。用高压灭菌锅在0.15Mpa/cm2压力下灭菌1520min，冷却备用。5.1.3茎尖剥离切取自来水冲洗后的项芽，先用70%乙醇浸泡5min，然后在无菌条件下剥去两层幼叶，再经一避表面灭菌。将经表面灭菌的芋芽在解削镜下测取小于0.8m的茎尖，接种到分化培养基上。5.1.4培养条件温度25~29℃，光照时数12h/d，光照强度150020001x。5.2病毒检测对经茎尖刹离（小于0.7）处理的培养苗，采用酶联免疫法进行芋头花叶病毒的检测。如未检出芋头花叶病毒，方可进行组培苗生产。不合格的脱毒苗不得用于组培快繁。继代扩紧中选留的脱毒苗：每年至少作一次病毒复检。5.3脱毒苗组培扩繁5.3.1脱毒苗来源2 DB37/T过按照5.2方法检测，脱除了病毒的组塔苗。5.3.2增殖培养基制备5.3.2.1增殖培养基:MS+1.0~2.0 mg/L, BA+0.1~~0.5 mg/L NAA5. 3. 2. 2培养基灭菌方法同5.1.2。5.3.3继代扩繁将株高1.5~2.0cm的脱毒苗接转到增殖培养基中，每瓶培养基接种3~4株，可反复继代培养繁殖约40d继代一次。5.3.4生根诱导5.3.4.1生根培养基：1/2MS+0.1mg/L，NAA+0.25mg/LBA（一次性成苗的品种可不用），培养基灭菌方法同5.1.2。5.3.4.2对不易生根的品种，将株高1.5~2.0cm的脱毒苗接转到生根培养基中，每瓶培养基接种5~6株，待株高达4cm以上，生根3条以上，根长2cm时即可炼苗移裁。5.3.5培养条件[同]5.1.4。5.4脱毒苗移栽5.4.1炼苗当试管苗株高4~6cm，生根35条，根长2cm左右时，掀开培养瓶上的盖瓶膜，炼苗3d，5.4.2苗床准备可用蛭石、草炭、珍珠岩或细沙作基质，蛭石、草炭、珍珠岩的体积比为1：1：1。5.4.3育苗脱毒组培苗移栽应在温室或大棚中进行。将脱毒试管苗取出，洗净培养基后移栽于填有基质营养钵中，将营养钵置于防虫温室或大棚内，保湿、保温（可加小拱棚），基质温度18～25℃，拱棚内相对湿度保持在9095%，培养1周，试管苗恢复生长。以后逐渐降低棚内湿度，当试管苗移裁成活后，生长至具4片叶以上，株高达15cm左右时可出面定植。6种芋繁