动物生理学实验三鱼类血液涂片制作与血细胞计数演示文稿.pptVIP

动物生理学实验三鱼类血液涂片制作与血细胞计数演示文稿 当前第1页\共有32页\编于星期三\0点 血液具有维持生物体内环境稳态的作用，正常情况下血液中的的各项生理指标处于相对稳定的状态，同时各项指标也能够反映一个生物个体的健康程度，因而血液检测已成为疾病检测最基本的技术。 多种多样的血液检测仪 当前第2页\共有32页\编于星期三\0点 血液检测能够辅助疾病诊断 当前第3页\共有32页\编于星期三\0点 血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，也是生物显微制片的基本方法之一，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值。制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术。 人体血液涂片 当前第4页\共有32页\编于星期三\0点 血液涂片技术在水产动物疾病检测过程中也有非常重要的作用，比如细菌感染、病毒感染以及血液寄生虫疾病的检测。目前该技术已成为水产技术从业人员的必备技能，也是执业资格考试的重点内容。 当前第5页\共有32页\编于星期三\0点 当前第6页\共有32页\编于星期三\0点 当前第7页\共有32页\编于星期三\0点 涂片经瑞氏-吉姆萨染色液染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。一般细胞的细胞核嗜碱性，能被碱性燃料染成蓝色，而细胞质基质嗜酸性，能被酸性燃料染成红色。 当前第8页\共有32页\编于星期三\0点 血细胞计数法是将小量待测样品血液的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上（又称细胞计数板），于显微镜下直接计数，根据血液稀释的倍数，进一步推算出血液中血细胞数的一种方法。 当前第9页\共有32页\编于星期三\0点 当前第10页\共有32页\编于星期三\0点 当前第11页\共有32页\编于星期三\0点 当前第12页\共有32页\编于星期三\0点 鱼类麻醉前后对比示意图 当前第13页\共有32页\编于星期三\0点 2、血液的采集 将准备好的2mL注射器，抽动活塞用肝素钠溶液将注射器内湿润，为血液的采集做好准备工作。血液的采集按实验2的采血方法进行，采好的血液保存于1.5 mL离心管中待用。 当前第14页\共有32页\编于星期三\0点 3、推片 取一块边缘光滑的载片做推片。将其一端刮取血滴，迅速使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°～40°，向另一端平稳地推出，涂片推好后，放置于空气中使之自然干燥。 （1）将采出的血液滴在载片上 当前第15页\共有32页\编于星期三\0点 （2）另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。 当前第16页\共有32页\编于星期三\0点 （3）两玻片的角度以30-45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。 当前第17页\共有32页\编于星期三\0点 （4）血涂片 当前第18页\共有32页\编于星期三\0点 不良血涂片 当前第19页\共有32页\编于星期三\0点 4、血涂片染色 先将干燥血片用甲醇固定3-5分钟，将固定的血片置于被pH 6.4-6.8磷酸盐缓冲液稀释10-20倍的吉姆萨染液中，浸染5分钟（标本较少可用滴染法），取出用蒸馏水冲洗，再用伊红复染1分钟，用蒸馏水冲洗，待干后镜检。 当前第20页\共有32页\编于星期三\0点 冲洗后滴加少量伊红，染色1分钟 直接流水冲洗1分钟 （切勿先倒掉染液） 涂片经水洗干燥后镜检 涂片干燥后加吉姆萨染液染色5分钟 当前第21页\共有32页\编于星期三\0点 二、血细胞计数 血细胞计数板的结构 XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格。0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高；1/400mm2表示计数室面积是1mm2 ，分为400个小格，每小格面积是1/400mm2。 当前第22页\共有32页\编于星期三\0点 当前第23页\共有32页\编于星期三\0点