藏药绿萝花超临界co.docx

藏药绿萝花超临界co 藏药绿湿花，又名金柿子、石鸡子、马蹄金，产于西藏寒冷地区。它的性质很冷，闻起来很香。是西藏特有的珍贵植物, 民间用于治疗糖尿病、冠心病、高血压及各种血管炎症, 具有良好的效果, 在当地应用较为普遍。但目前尚未见绿萝花提取工艺及药理作用的研究报道。作者采用超临界二氧化碳流体萃取技术提取绿萝花中的脂溶性成分, 并优化工艺, 参考相关文献 1 仪器、试剂和动物 1.1 仪器 1.2 氧氧化酶及甲苯磺丁脲 绿萝花 (西藏福神药材开发有限公司) ;四氧嘧啶为BDH公司产品 (英国) ;甲苯磺丁脲为广东华南药业有限公司产品;血清葡萄糖测定试剂盒为浙江温州东欧生物工程有限公司产品。 1.3 医用动物 Wistar大鼠 (合格证号:26-2003A002) , 体重 (200±20) g, 雌雄各半, 由广东省卫生厅医用动物中心提供。 2 方法和结果 2.1 fe-co 将200g绿萝花粉末投入萃取釜中, 对萃取釜、解析釜Ⅰ、贮罐分别进行加热, 当达到所选定的温度时, 开启CO 2.2 正交试验选择最佳工艺 选择萃取压力 (A) 、萃取温度 (B) 、解析压力 (C) 、解析温度 (D) 4个主要因素, 各设定三个水平, 设计4因素3水平正交试验L 以萃取率为指标, 则优化工艺为A 2.3 中试放大实验 取绿萝花药材5kg (n=3) 按最佳工艺条件进行中试放大实验, 各批次的萃取率分别为2.50%、2.54%及2.48%, 表明重复性良好, 该工艺切实可行。 2.4 绿葡萄提取物对实验动物血糖的影响 2.4.1 单次抗糖试验 2.4.1. 空腹血糖测定 取Wistar大鼠30只, 雌雄各半, 随机分为绿萝花组、甲苯磺丁脲组和盐水组, 每组10例, 各组禁食20h后断尾取血, 测定空腹血糖。单次灌胃给药后1.5、3、5h断尾取血测血糖, 结果见表3。 2.4.1. 目标血的测定 取Wistar大鼠50只, 雌雄各半, 尾静脉注射2.5%四氧嘧啶35mg/kg, 1周后断尾取血测血糖。凡血糖低于2g/L者剔除, 将血糖2g/L随机分为绿萝花组、甲苯磺丁脲组和盐水组, 断尾取血测单次灌胃给药后1.5, 3, 5h血糖, 结果见表4。 2.4.2 多次给药以降低血糖 2.4.2. 连续给药后各时间点血糖的测定 取Wistar大鼠30只, 雌雄各半, 随机分为绿萝花组、甲苯磺丁脲组和盐水组, 每天2次, 连续灌胃给药20d, 分别在给药后第5、10、15、20d断尾取血测血糖, 结果见表5。 2.4.2. 制备致糖尿病模型 取Wistar大鼠80只, 雌雄各半, 用四氧嘧啶制备实验性糖尿病模型, 方法同前。将1周后血糖超过2g/L大鼠取出, 其余随机分为绿萝花组、甲苯磺丁脲组和盐水组, 给药方法和测定血糖时间同前, 结果见表6。 2.4.2. 有效作用时间确定 取Wistar大鼠 (用四氧嘧啶制备实验性糖尿病) 30只, 雌雄各半, 连续灌胃20d, 在末次给药不同时间测血糖, 以测定有效作用时间, 结果见表7。 3 超临界萃取药物的性质、作用 藏药绿萝花香气浓烈, 含有较多的挥发性成分, 因此我们选择超临界二氧化碳萃取技术提取药材中的亲脂性有效成分, 并对提取工艺进行了优化, 得到了最佳工艺参数:萃取压力20MPa、萃取温度45℃、解析压力8MPa、解析温度50℃。对于超临界萃取后的药渣, 我们将进一步采用水提或低浓度醇提的方式研究其亲水性成分。药理研究结果表明, 绿萝花超临界提取物对实验性糖尿病大鼠血糖有显著的降血糖作用, 并呈良好的剂量相关性, 有效作用时间在6小时以上, 但对正常大鼠的血糖无明显影响。但其提取物中的降血糖作用的化学成分, 还有待进一步研究。绿萝花在当地资源丰富, 民间应用广泛, 该研究为其治疗糖尿病的作用提供了一定的实验依据, 使绿萝花可望成为开发降血糖药物的新资源。 HA231-50-06型超临界萃取装置, 江苏南通华安超临界实业公司。