DB44_T 961-2011化妆品中酸性橙7的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 71. 100. 70Y 42备案号：32916-2012DB44广东省地方标准DB44/T 961—2011化妆品中酸性橙7的测定高效液相色谱法Determination of acid orange 7 in cosmetics by high performance liquidChromatographic method2011-12-21发布2012-04-01实施广东省质量技术监督局发布 DB44/T 961—2011前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草，本标准由广州市质量监督检测研究院提出。本标准由广东省质量技术监督局归口。本标准起草单位：广州市质量监督检测研究院本标准主要起草人：党华、黄金风、林森煜、吴钟玲、范莹莹。本标准首次发布。 DB44/T 961—2011化妆品中酸性橙7的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了化妆品中酸性橙7的测定方法，本标准适用于化妆品中酸性橙7的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的：凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（IS03696：1987，MOD）3原理非蜡基类化妆品试样直接用甲醇提取：蜡基类化妆品试样用三氯甲烷分散后，用水提取：提取液经离心、过滤后，采用高效液相色谱法测定，以保留时间定性，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1甲醇：色谱纯，4. 2三氮甲烷。4. 3磷酸二氢钾。4. 4磷酸二氢钾溶液（0.02mol/L）：准确称取2.722g磷酸二氢钾（4.3），用水溶解后定容至1L4. 5酸性橙7对照品：CAS登录号为633-96-5，INCI号为CI15510。4. 6酸性橙7贮备液（1000μg/mL）：准确称取酸性橙7对照品（4.5）100mg，置于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解，并稀释至刻度，摇勾。于4℃避光保存，可保存6个月。4.7滤膜：聚四氟乙烯过滤膜（孔径为0.22m）。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。5.2分析天平：感量0.1mg5.3凝涡振荡器。1 DB44/T 961—20115. 4超声波清洗仪，5. 5高速离心机：转速15000r/min或以上（相对离心力20627×g或以上）分析步霖6.1试样处理6. 1. 1非蜡基类试样准确称取0.5g（精确至0.001g）试样，于10mL具塞比色管中，加入4mL甲醇，于凝涡报荡器（5.3）上振荡混勾后，超声提取15min，冷却至室温，用甲醇定容至5mL.取部分溶液于离心管中，高速离心5min，上清液经滤膜（4.7）过滤后测定。6.1. 2蜡基类试样准确称取0.5g（精确至0.001g）试样，于50mL离心管中，加入5mL三氯甲烷（4.2），于漩涡振荡器上振荡混匀后，超声15min，冷却至室温，加入5mL水，凝涡振荡2min，取部分上层溶液于离心管中，高速离心5min，上清液经滤膜过滤后测定。6. 2测定6.2. 1高效液相色谱参考操作条件a)色谱柱：C18，5μm，250mm×4.6mm;b)流动相：甲醇和磷酸二氢钾溶液（0.02mol/L）（4.4），梯度洗脱参数见表1：c)流速：1.0mL/min:(p柱温：30℃：c)波长：480nm：f)进样量：20L表1高效液相色谱梯度洗脱条件时间/min甲醇/%（V/V)磷酸二氢钾溶液（0.02mol/L）/%（V/V)0°05955.0 653512.0653512.1 59522.05956. 2. 2标准工作曲线制作用甲醇逐级稀释酸性橙7备液（4.6）得到0.25μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL标准工作溶波，按色谱条件（6.2.1）进行测定，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作图，制作标准工作曲线。对照品的液相色谱图及光谱图参见附永A2 DB44/T 961—20116.2.3测定按色谱条件测定试样溶液（6.1），记录峰面积，以外标法定量。按相同步骤同时做空白实验。试样溶液中的被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。结果计算结果按式（1）计算：-000[×I×f式中：x-试样中酸性橙7的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)：Cr试样溶液中酸性橙7的浓度，单位为微克每毫升(ug/mL)：Co空白样品中酸性橙7的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)：V试样溶液定容体积，单位为毫升(mL)：试样质量，单位为克(g)：稀释倍数：结果保留二位有效数字。8检出限与定量限当称样量为0.5g，定容体积为5mL时，酸性