DB11T 375-2006水生动物检疫名录及病原检测方法.pdf

ICS 65.150B 50备案号：19166-2006DB北京市地方标准DB11/T 375—2006水生动物检疫名录及病原检测方法Aquatic Animal Quarantine Directory and Disease Inspection Method2006-07-25发布2006-10-01实施北京市质量技术蓝督局发布 DB11/T 3752006前言本标准以《中华人民共和国动物防疫法》、《中华人民共和国渔业法》、《中华人民共和国动物防疫法一、二、三类动物疫病病种名录》、《中华人民共和国进境动物一、二类传染病、寄生虫病名录》、《国际水生动物卫生法典》为基础，参考中华人民共和国动物疫病的防疫检疫相关法律、法规和相关标准，并结合北京市水产养殖业的特点，强调了水产养殖生产和流通中，需要严格控制、检疫的疫病及其判定方法，本标准的附录A、B、C、D、E、F、G、H、I、J均为资料性附录.本标准由北京市农业局提出并归口本标准起草单位：北京市水产技术推广站本标准主要起草人：王妹、股守仁、徐立蒲、盛竹梅、高南 DB11/T 3752006B.2.4.1配制试剂B.2.4.1.1生理盐水的配制称取氯化钠8.5g，溶于1000ml蒸增水中即可B.2.4.1.2碘液的配制分别称取4g碘化钾和2g碘，并量取蒸增水100ml，先将碘化钾溶于水中，然后再加碘，溶解后贮存于棕色瓶中备用。B.2.4.2制片B.2.4.2.1将鱼的肌肉和头部募成小块，勾浆，加入少量生理盐水，并搅拌均勾，静置或微离心以除去杂质。取上清液再次轻微离心，将包囊沉淀下来，去掉上清液，用生理盐水重悬沉淀。B.2.4.2.2在洁净的载玻片上滴加1滴上述的样品液，在其上滴1滴碘液，涂布均匀，覆以盖玻片。B.2.4.3镜检在碘液涂片中，包囊的胞浆被染成黄色或浅福色，糖原泡为棕色，囊壁、核仁和拟染色体均不着色可以看到包囊内的维形虫体。虫体骨腹扇平，呈叶状，前端稍尖，后端较钝，体被无棘，透明，口吸盘略大于腹吸盘，腹吸盘位于体前端1/5处，消化器官包括口、和短的食道及两肠支，肠支伸达虫体后端，尚无繁紫殖系统。9 DB11/T 3752006附录C（资料性附录）鲤痘疮病的检测C.1病原鲤疱疹病毒（H.cyprini）-C.2流行情况此病流行于欧洲，现在日本及我国均有病例发生，主要危害鲤鱼，鲫鱼等，影响鱼的生长及降低鱼的商品价值，在越冬后期可引起病值死亡，C.3临床检查早期病鱼的体表出现小的斑点，以后变厚、增大，其形状及大小各异，直径可从1量米左右到数厘米，厚1-5厘米左右，严重时可晚合成一片，增生物表面原为光滑，后来变得有些粗糙，玻璃样或蜡样，有时不透明：颜色为浅乳白色、奶油色，以至祸色，C.4实验室检查C.4.1石蜡组织切片将分离的体表增生物进行固定、脱水、透明等处理后，石蜻切片，H.E.染色，镜下观察。可以看到增生物为上皮细胞和结缔组织增生，有些上皮细胞的核内有包涵体。C.4.2透射电镜观察增生物超薄切片，在射电镜下可见在严重变性的细胞内有疮疹病毒，内质网扩张粗稳，线粒体肿胀，靖不清楚，核糖体增多，核内仅显示少量周边染色质。10 DB11/T 375—2006附录D（资料性附录）鳃霉病的检测D.1 病原熙霉菌（Branchionyces sp.）D.2流行情况通过孢子与鳃直接接触而感染。主要在夏秋季流行，当水质恶化时易暴发此病。该病出现往往是急性的，如条件合适一两天内即可大量繁殖，鱼苗即出现暴发性急性死亡。D.3 症状病鱼不喜摄食，游动缓慢，呼吸困难，鳃出血或失血，鳃上粘液增多，部分鳃丝发白并腐烂。D.4实验室检查先用肉眼观察鱼的鳃部，如出现上述症状则必须进行镜检，募少许鳃丝，盖上盖玻片在显微镜下检查，当发现鳃上有大量分枝状菌丝寄生时即可做出诊断。11 DB11/T 3752006附录E（资料性附录）嗜水气单胞菌的检测E.1病原嗜水气单胞菌（Aerononas hydrophila)E.2流行情况该细菌能危害多种淡水、海水鱼类，还感染一些软体动物和两栖动物，本菌在世界各地广泛存在，它是条件性致病菌，鱼类染后一般不发病，一且环境污染，鱼体抵抗力降低，就会爆发性发病，E.3临床检查两鱼皮肤出血、腹部膨大，瞬片外竖，眼球笑出，慢性的表现为皮肤锁疡。剖检后可见肝、肾白或因胆汁没润而变绿，肾肿大发脆由于细菌毒素的作用而肝、肾内部结构造到碳坏。鱼的鳃、腹膜和肌肉呈点状出血，体腔充满血样渗出液，后肠和肛门肿大、发炎、出血，肛门外髓，肠道内充满粘液样物质.E.4实验室检验E.4.1病料的采集和处理采取病鱼的肾、肝、脾、混、腹膜等。E.4.2病原菌分离病鱼的肾、肝、脾等研碎，制成混悬甚液，接种血琼脂或添加10mg/L氨节青霉素的血琼脂、脑心没液或胰酪陈大豆琼脂培养基，放于28℃条件下培养