DB37T 1248-2009化妆品中孔雀石绿的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

1CS 67.020X 04DB37山东省地方标准DB37/T妆品中孔雀石绿的测定液相色谱串联质谱法Determination of malachite green in cosmetics Liquidchromatography-tandom mass spectrometry2009-05-31发布2009-07-01实施山东省质量技术监督局发布 DB37/T标准附录A、B为资料性附录。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量监督检验研究院。本标准主要起草人：周莉莉、祝建华、王骏、刘艳明、薛霞。 DB37/T1248—2009化妆品中孔雀有绿的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了化妆品中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的液相色谱一串联质谱测定方法。本标准适用于护理类和眼部修饰类化妆品中孔雀石绿及隐色孔备石绿的定性确证和定量测定。本标准方法孔雀石绿和隐色孔雀石绿的检出限均为1.0g/kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的弓用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的弓用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。B/T6682分析实验氢用水规格和试验方法3原理试样用甲醇提取，经中性氧化铝和阳离子固相萃取柱净化、富集。用液相色谱一串联质谱法测定，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1E甲醇：色谱纯。4.2二氯甲烷。4.30.25g/nL氯化羟胺溶液：称取25.0g氯化羟胺，用水溶解并定容至100mL。4.41.0mpl/L甲苯-4-磺酸溶液：称取17.2g甲苯-4-磺酸，用水溶解并定容至100mL。4.51mL/L甲酸溶液：量取1ml甲酸，用水稀释并定容至IL。4.620mL/L甲酸溶液：量取20mL甲酸，用水稀释并定容至1L。4.750mL/L氨水甲醇溶液：量取5mL氨水，用甲醇稀释并是容至100L。4.8中性氧化铝柱：1g/3ml。使用前用5mL甲醇活化。4.10标准品：孔雀石缘（mlachite green，MG）和隐色孔雀石绿（Lelcomlachitegreen，LMG），纯度大于98%。4.11标准储备溶液：准确称取适量的孔雀石绿和隐色孔雀石绿标准品，用甲醇分别配制成100Ⅱg/L的标准储备液。-18℃避光保存。4.12混合标准中间溶液（1μg/mL)：分别准确吸取1.00L孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准储备溶液（4.11）至100L容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，1L该落液分别含1μg的孔雀石绿和隐色孔雀石绿。4.133微孔滤膜：有机相，0.2μm5仪器和设备5.1液相色谱-串联质谱联用仪：配有电喷雾（ESI）电离源。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。5.3旋涡混合器。5.4超声波提取器。 DB37/T 124820095.5离心机（转速不低于3000r/min)。5.6全自动固相萃取仪或固相萃取装置。5.7旋转蒸发仪。6样品制备6.1在采样和制备过程中，应防止样品受到污染或待测组分含量发生变化。6.2[固体样品取其可用部分，磨醇均匀，保存备用6.3液体样品充分混匀后，直接取用。7测定步骤7.1试样处理7.1.1固体样品7.1.1.1提取称取试样5g（精确至0.01g）于50nL高心管中，准确加入25.OnL甲醇，振摇，旋涡Imin，超声波提取10mins3000r/min离心5mins静置备用。7.1.1.2净化移取5.00上清液加至已活化的中性氧化铝柱（4.8)上，3mL甲醇洗涤中性氧化铝柱，收集到10=L离心管中，用1mL/L甲酸水溶液(4,5)定容至10.0mL，旋涡1min，样液经α.2m滤膜过滤后供液相色谱一串联质谱测定。对孔雀石绿和隐色孔雀石绿含量较高的样品，适当稀释后进样。7.1.2液体样品7.1.2.1提取称取试样5g（精确至0.01g）于100nL离心管中，依次加入ImL氯化羟胺（4.3）、2L甲苯-4-磺酸（4,4）2L1mL/L甲酸溶液（4,5）和40ml甲醇，报播，旋涡1min，超声波提取10min，3000r/min高心min，将上清液转移到250ml分液漏斗中，于分液漏斗中加入30L二氧甲烷、35ml水，振播2min，静置分层，收集下层有机层于100L鸡心瓶中，再用20L二氯甲烷萃取一次，合并二氯甲烷层，45℃旋转蒸发近干。7.1.2.2净化将中性氧化铝柱（4.8）串接在阳离子交换柱（4.9）上方。用6L甲醇分两次(每次3mL)用旋涡报荡器旋涡溶解上述提取物，并依次过柱，再