DB37_T 3712-2019公英青蓝合剂中添加金刚乙胺的测定　超高效液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS11.220B 42DB37山 東东省地方标准DB 37/T 3712—2019公英青蓝合剂中添加金刚乙胺的测定超高效液相色谱-串联质谱法Determination addition of rimantadine in gongyingqinglan mixtureUPLC-MS/MS2019-11-18发布2019-12-18实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 3712—2019目次前言111范围.2规范性引用文件3原理4试剂或材料，5仪器设备6试验步骤6.1样品溶液的制备6.2基质匹配对照溶液的制备6.3仪器参考条件6.4测定7试验数据处理8精密度附录A（资料性附录）金刚乙胺特征离子质量色谱图 DB37/T 3712—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所。本标准主要起草人：张传津、魏秀丽、李有志、陈玲、张志民、赵有轩、张呈军、章安源、尹伶灵II DB37/T 3712—2019公英青蓝合剂中添加金刚乙胺的测定超高效液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了公英青蓝合剂中金刚乙胺的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于公英青蓝合剂中金刚乙胺的测定。本方法检测限为2μg/mL，定量限为5μg/mL。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理公英青蓝合剂中的金刚乙胺经稀释后，超高效液相色谱串联质谱测定，依据保留时间和离子丰度比定性，外标法定量。4试剂或材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯：水符合GB/T6682一级水的规定。4.1甲醇（CH/OH）：色谱纯。4.2甲酸（HCOOH）：色谱纯。4.3流动相：a)流动相A甲醇(含0.1%甲酸)：吸取甲酸（4.2）1.0mL，加甲醇（4.1）稀释至1000mL，过0.22m微孔滤膜备用：b)流动相B水落液（含0.1%甲酸）：吸取甲酸（4.2）1.0mL，加水稀释至1000mL，过0.22μm微孔滤膜备用：c)初始比例流动相：量取甲醇（含0.1%甲酸）（4.3.1）100mL与水溶液（含0.1%甲酸）（4.3.2）400mL，混匀，备用。4. 4金刚乙胺对照品，纯度不得小于99.9%4. 55金刚乙胺对照储备液：称取金刚乙胺对照品（4.4）10g（准确至0.01mg），置100mlL容量瓶中，加甲醇（4.1）溶解并稀释至刻度，摇匀。4℃冰箱保存，有效期3个月。4.6有机微孔滤膜：0.22μm5仪器设备1 DB37/T 3712—20195.1高效液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）5.2分析天平：感量0.00001g。5.3离心机（5 000 r/min）试验步骤6.1样品溶液的制备公英青蓝合剂摇匀，精密吸取空白公英青蓝合剂0.2mL，置50mL离心管中，加19.8mL甲醇（4.1），超声处理10min，5000r/min离心5min，有机微孔滤膜过滤，精密量取滤液1mL，置50mL容量瓶中加初始流动相（4.3.3）稀释至刻度，摇匀，有机微孔滤膜滤过，即得空白基质溶质。待测样品以上法处理，得供试样品溶液。6. 2基质匹配对照溶液的制备精密吸取金刚乙胺对照储备液（4.5）0.2mL，置20mL容量瓶中，加空白基质落液（6.1）稀释至刻度，摇匀，从中精密量取1mL置50mL容量瓶中，加空白基质溶液（6.1）稀释至刻度，摇匀，滤过，即得20ng/ml的对照溶液，6.3仪器参考条件6. 3.1高效液相色谱参考条件色谱柱：Cis色谱柱，50mm×2.1mmX1.7μm，或性能相当者。流动相A：甲醇（含0.1%甲酸）。流动相B：水溶液（含0.1%甲酸）流速：0.3ml/min。进样量：10μL柱温：35℃。液相色谱梯度洗脱条件见表1。表1液相色谱梯度洗脱条件时间/nin流速/(ml. · min)流动相A/%流动相B/%曲线00. 320080. 50. 00. 38020t03. 00. 38020t00. 3208050. 320086. 3. 2质谱参考条件电离模式：电喷雾正离子（ESI）。毛细管电压：3kv。离子源温度：110℃，脱溶剂温度：320℃.2 DB37/T 3712—2019脱溶剂氮气流速：550L/h。检测方式：多反应监测（MRM）金刚乙胺的定性、定量离子对和碰撞能量见表2。表2定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞能量品名定量离子对定性离子对锥孔电压/V硅撞能量/eV金刚乙胺180. 6163. 2180.