LS_T 6139-2020粮油检验粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速定性检测.pdf

LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T 6139—2020粮油检验粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速定性检测Inspection of grain and oilsRapid screen determination for organophophate andcarbamate pesticide residues in grains2020-01-21发布2020-07-21实施国家粮食和物资储备局发布 LS/T 6139—2020前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家粮食和物资储备局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口，本标准起草单位：国家粮食和物资储备局科学研究院、广东省粮食科学研究所、山东省粮油检测中心、陕西省粮油产品质量监督检验中心、中国储备粮管理集团有限公司、北京市粮油食品检验所、黑龙江省食质量安全监测中心、安微省粮油产品质量监督检测站、内蒙古自治区粮油质量检测中心、潮北省粮油食品质量监督检测中心、山西粮食质量监测中心、河南省粮食科学研究所有限公司、北京中检葆泰生物技术有限公司，本标准主要起草人：叶金、王松雪、王亚军、王培、蒋国振、李克强、员琴、季渊洋、胡斌、邱庆丰、孙婷琳、康然、牛梦宇、李华。 LS/T 6139—2020粮油检验粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速定性检测1范围本标准规定了粮食及其制品中有机碳类和氨基甲酸醋类农药残留的快速定性检测的原理、试剂和材料、仪器和设备、样品制备和结果分析等内容，本标准适用于粮食及其制品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留的快速定性检测。本标准的方法检出限见附录A，2规范性引用文件下列标准对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件，GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T 5491报食、抽料检脸扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理样品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留抑制昆虫酯酶和酶受体反应，荧光底物被激活发出荧光酵抑制率比较，从而快速定性判定样品中有机磷类和氨基甲酸酯类农药是否超标。4试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。4.1丙酮.4.2乙酸乙酯，4.3无水硫酸钠。4.44.5硫酸钠溶液取200g无水硫酸钠，用水溶解后稀释至1000mL，混匀.4.6磷酸盐缓冲溶液（以下简称PBS)；称取8.00g氟化钠、1.20g磷酸氢二钠（或2.92g十二水磷酸氢二销）、0.20g磷酸二氢钾、0.20g氯化钾，用900mL水溶解，用盐酸调节pH至7.4士0.1，加水得释至1 000 mL,4.71%TritonX-100（或吐温-20）的PBS取10mLTritonX-100（或吐温-20），用PBS稀释至1 000 mL.- LS/T 6139—20204.8昆虫酯酶落液，取30.0mg昆虫酯酶加人PBS，混勾，由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。4.9荧光索酶受体溶液；取0.5mg荧光索酶受体加人10mL水，混匀，由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。4.10荧光底物溶液取1.0mg荧光底物加人10mL1%TritonX-100(或吐温20)的PBS，混勾。可由农药残留快速检测产品配套提供，或按照其说明书进行配制。5仪器和设备5.1天平：感量0.01g。5.2粉碎机：电机转速≥1000r/min，可使试样粉碎后全部通过20目(0.850mm)筛。5.3吹干仪：湿度≥45℃。5.4炭涡振捞器。5.5高心机：转速≥4500r/min，5.6离心管，10mL5.7螺口带盖检测微管：1.5mL，5.8孵育器，温度≥35℃。5.9荧光检测仪：激发波长460nm~550nm，发射波长590nm。6样品制备6.1扦样与分样按照GB/T5491执行。6.2用粉碎机(5.2)将样品粉碎至全部通过20目筛，充分混合均勾。6.3样品提取2mL乙酸乙酯-丙酮溶液（4.4)，器匀，在4500r/min下离心2min，取100pL上清液至2mL高心管中，在45C下吹至近干，加入1mL水复溶，此溶液为待测溶液A，注：不同广家的样品费取可能会略有不同，应按照产品使用说明中规定方法进行操作，6.4测定步票准确吸取100μL待测溶液A(6.3)加人检测微管（5.7)中，然后加人50μL昆虫酯酶溶液（4.8)，混匀。将微管置于35C的孵育器（5.8)中，孵育10min。向微管底部加人50μL炎光累酶受体落减（4.9)，混匀。将微管置于35C的孵育器(5.8)中，孵育5min，然后微管加人1mL荧光底