DB37_T 4050-2020中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定 超高效液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 11. 220B 41DB37山 長东省地電方标准DB37/T4050—2020中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定超高效液相色谱-串联质谱法Determination of sulfonamides added to chinese veterinary drug powderUltra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry2020-07-09发布2020-08-09实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 4050—2020目次前言11范围2规范性引用文件3原理，4试剂或材料5仪器设备6试验步骤6. 1朗性样品6. 2提取6. 3仪器参考条件6. 4测定7试验数据处理8精密度附录A（资料性附录）磺胺类药物特征离子参考质量色谱图 DB37/T 4050—2020前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省兽药质量检验所、威海市畜牧业发展中心。本标准主要起草人：魏秀丽、徐恩民、张传津、张志民、尹伶灵、刘宵飞、陈玲、王燕、陈志强、赵国清。II DB37/T 4050—2020中兽药散剂中添加磺胺类药物的测定超高效液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了中兽药散剂中磺胺类药物的超高效液相色谱-串联质谱测定方法，本标准适用于中兽药散剂（白头弱散，黄连解毒散、清瘟败毒散）中添加磺胺啶、磺胺甲基异吨唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺唑嗯啉的测定。本方法的检出限为0.2mg/g，定量限为0.5g/g。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理中兽药散剂中添加的磺胺类药物经提取后，超高效液相色谱-串联质谱测定，依据保留时间和离子丰度比定性，外标法定量。4试剂或材料除非另有规定，所用试剂均为色谱纯。4.1水符合GB/T6682一级水的规定。4.2乙腈（CHCN）：色谱纯。4.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。4.4甲醇（CH,OH）：色谱纯。4.5流动相：流动相A（0.1%甲酸水溶液）：吸取甲酸（4.3）1.0mL，加水稀释至1000mlL，过0.22μm微孔滤膜备用：—流动相B(0.1%甲酸乙）：吸取甲酸（4.3）1.0mL，加乙腈（4.2）稀释至1000mL，过0.22μm微孔滤膜备用：初始流动相：量取0.1%甲酸乙精50mL与0.1%甲酸水落液450mL，混匀，备用，4.6五种磺胺类药物对照品：磺胺嘧啶，磺胺甲基异嗯唑，磺胺间甲氧嘧啶，磺胺二甲嘧啶，磺胺唑呕咪，纯度≥95.0%。4.7混合标准储备液：称取五种磺胺类药物对照品（4.6）各10g（准确至0.01g），分别置10mlL容量瓶中，加甲醇（4.4）落解并稀释至刻度，摇匀，得五种磺胺类药物对照品落液。准确吸取五种硕1 DB37/T 4050—2020胺类药物对照品溶液各1.0mL，置10mL容量瓶中，加甲醇（4.4）稀释至刻度，摇匀，得混合标准储备液，4℃冰箱保存，有效期3个月。4.8标准曲线制备：吸取混合标准储备液适量，用初始流动相稀释，制备成系列浓度为：10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/ml的标准工作液，作标准曲线。100ng/mL工作液作为超高效液相色谱一串联质谱（UPLC-MS/MS）的对照品溶液。4.9有机微孔滤膜：0.22μm。5仪器设备5. 1超高效液相色谱串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）。5. 2分析天平：感量0.01g，0.00001g-5. 3离心机：5 000 r/min。5. 4超声波清洗机。6试验步骤6. 1阴性样品未添加五种磺胺类药物的样品。6. 2提取取试样1g（准确至0.01g），置离心管中，加10mL甲醇，提取5min，5000r/min离心10min，取上清液，逐级稀释10000倍，用滤膜（4.9）过滤，得UPLC-MS/MS供试品溶液，待测。6. 3仪器参考条件6.3.1高效液相色谱参考条件色谱柱：Cs，50mm×2.1mm，粒径1.7μm，或性能相当者。流动相A：0.1%甲酸水溶液。流动相B：0.1%甲酸乙睛。流速：0.25 ml/min。进样量：10μL。柱温：35℃.液相色谱梯度洗脱条件见表1。表1液相色谱梯度洗脱条件时间ABnin%%090104. 0 55454. 2 9010 5. 09010 6.3.2质谱参考条件2 DB37/T 4050—2020扫描模式：电喷雾正离子（ESI）。毛细