SN_T 4592-2016出口食品中总黄酮的测定.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4592—2016出口食品中总黄酮的测定Determination of total flavonoids in export food2016-08-23 发布2017-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局、刮涂层查真伪 SN/T 4592—2016前言本标准按照GB/T 1.1一2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国宁夏出人境检验检疫局。本标准起草人：陈林、郝俊虎、孙敏、袁英、闫永利、周海波、杨旭光、李竹岩、李萍。 SN/T 4592—2016引言黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的类天然化合物的总称（Flavonoids），其广泛存在于植物中，多以苷类形式存在。黄酮类化合物是部分食品及制品中主要的抗氧化活性成分之一。黄酮类化合物的测定有多种方法，对于黄酮类化合物的相互分离以及单一一成分的定量分析，常采用高效液相色谱法。而对于总黄酮含量的测定，则主要采用分光光度法。本标准采用分光光度法测定出口食品中总黄酮的含量，具有设备要求简单、操作简便、易于推广普及的特点。I SN/T 4592—2016出口食品中总黄酮的测定1范围本标准规定了出境食品中黄酮类化合物总量的分光光度法检测方法。本标准适用于出境枸杞、茶叶、葡萄酒等植物源性食品中黄酮类化合物的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的一类天然化合物的总称，本方法利用其与铝盐进行络合反应,在碱性条件下生成黄色的络合物，在 420 nm波长下测定其吸光度,在定浓度范围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比。与芦丁标准品比较，进行待测物中总黄酮的定量测定。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。4.1硝酸铝EAI(NO:)·9H2O]。4.2硝酸铝溶液（100 g/L）：称取 Al(NO:）：·9H²O 17.6 g，加水溶解，定溶于100 mL容量瓶中。4.3醋酸钾（CH3COOK）。4.4醋酸钾溶液（98 g/L）：称取醋酸钾 9.814 g，加水溶解，定溶于100mL容量瓶中。4.5芦丁标准品，CAS号153-18-4。4.6芦丁标准溶液：精密称取经干燥（120℃减压干燥）至恒重的芦丁标准品50 mg,使用无水乙醇溶解并定容于 50 mL容量瓶中。4.7 无水乙醇(C²H;OH)。4.830%乙醇(无水乙醇与蒸馏水按3：7比例配制）。5仪器设备5.1分光光度计，采用1cm比色皿。5.2分析天平：感量为0.01g和0.0001g。5.3组织捣碎机。5.4超声清洗仪。5.5离心机。1 SN/T 4592—20166试样制备与保存6.1试样制备6.1.1枸杞干果、葡萄干等含糖量较高的固体样品：将待测固体样品置于冷冻状态进行冷冻，成块后放人高速组织捣碎机中进行粉碎，粉碎后样品过40目筛，混合均匀。混合均质好的样品存放于20℃避光保存。含糖量较低不易结块的样品：直接使用高速组织捣碎机进行粉碎，过40目筛，混匀后存放于20℃避光保存。6.1.2果汁、葡萄酒等存放于4℃冷藏箱中避光保存。6.2试样保存制样操作过程应防止样品受到污染。7 测定步骤7.1提取枸杞干果、葡萄干、果脯等固体样品，精密称取样品 1g（精确到1 mg)置于100 mL烘干恒重三角瓶中。果汁、葡萄酒等吸取5 mL～10 mL样品置于.100 mL烘干恒重三角瓶中，称重（精确到1mg)供后续测定使用。加人约30mL无水乙醇（4.7)充分摇匀样品，将摇匀样品置于超声清洗器中超声浸提1h，其间每20 min摇匀溶液一次。对于脂肪、色素等杂质较多的样品可加入适量石油醚提取，移除石油醚。提取液过滤至50mL容量瓶中，使用无水乙醇（4.7)冲洗滤纸、三角瓶，合并溶液，待溶液冷却至室温，用无水乙醇(4.7)定容至 50 mL待测。7.2标准曲线的绘制精密吸取芦丁标准品工作溶液1mL,2mL.3.mL4mL，5mL.分别置于50mL容量瓶中。加无水乙醇（4.7)至总体积为15 mL，依次加人硝酸铝溶液（4:2）1mL，醋酸钾溶液（4.4)1 mL，摇匀，加水至刻度，摇匀。静置1h，用1cm比色Ⅲ于420nm处，以30%乙醇溶液4.8为空白，测定吸光度。以50mL中芦丁质量（mg)为横坐标，吸光度为纵坐标,绘制标准曲线或按直线回归方程计算。7.3空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。7.4　测定精密吸取待测样品溶液1.0mL，置于50mL容量