SN 1243-2003国境口岸黄热病检验规程.pdf

P中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1243—2003国境口岸黄热病检验规程Examination codes for yellow fever at frontier port2003-05-28 发布2003-12-01 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1243—2003目次前言1范围2 术语和定义3对象.4.标本的采集和处理5准备6实验室检验方法7生物安全及防护措施8检验结果报告 阳性结果的处置9附录A（资料性附录)黄热病检验常用器材附录B（资料性附录)黄热病检验常用溶液及配制附录C（规范性附录）黄热病的实验室检验方法中电电国业电国电国国国业附录D（规范性附录)黄热病实验室检验生物安全及防护措施1.5参考文献.6 SN/T 1243—2003前言本标准的附录 C、附录 D为规范性附录,附录 A、附录 B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准由中华人民共和国海南出人境检验检疫局负责起草，中华人民共和国上海出人境检验检疫、中华人民共和国广东出人境捡验检疫局参与起草。本标准主要起草人：黄迁学、易厚广、章琪、潘德观。本标准为首次发布的检验检疫行业标准。Ⅱ SN/T 1243—2003国境口岸黄热病检验规程1范围本标准规定了国境口岸黄热病的检验对象、检验方法、检验结果报告、阳性结果处置。本标准适用于国境口岸的黄热病检验。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1黄热病 yellow fever由黄热病毒引起的急性传染病，主要流行于南美洲和非洲热带地区，埃及伊蚊是黄热病的主要传播媒介。3 对象3.1人境人员(黄热病染疫人、黄热病染疫嫌疑人)或灵长类动物。3.2国境口岸内和人境交通工具、运输设备、货物中所携带的黄热病传播媒介。4标本的采集和处理4. 1 病人血清早期病人血液标本(宜在发病三日内)或第二第血液标本(宜在三周至四周)采集后,冷藏条件下迅速送实验室，当日分离血清。如不能立即接种乳鼠或做细胞培养，血液标本应先放人超低温冰箱（一80℃）或液氮罐内保存。4.2组织标本采集死亡病例的肝、肾、肠壁等组织，放人低温冰箱（一30℃），作病毒分离或其他检测用。4.3蚊体标本采集的蚊子待胃内血液全部消化后冰冻致死，并经处理后，取上清液接种于细胞或乳鼠。4.4标本标识采集的标本应进行标识,连同相关记录一并送实验室。5 准备检验设备、器材、试剂的准备参见附录 A和附录 B。6实验室检验方法国境口岸黄热病实验室的检验方法如下：核酸分子检测;一抗体检测；抗原检测，病毒分离鉴定。具体检验方法见附录 C。 SN/T 1243-—20037生物安全及防护措施黄热病实验室的生物安全及防护措施按照附录D的规定操作。8检验结果报告8.1根据检验结果，未分离到黄热病毒时,报告为未检出黄热病”。8.2根据检验结果,分离到黄热病毒时,报告为“检出黄热病毒”8.3患者双份血清中，若恢复期血清抗体效价较急性期增高四倍以上可报告为黄热病抗体阳性，单份血清 IgM抗体1：40以上可报告为黄热病IgM抗体阳性；单份血清的血凝抑制抗体滴度1：320.补体结合抗体滴度1：16以上，结合临床表现具有诊断意义。9阳性结果的处置对初次病毒分离株及相应标本应送上级实验室(或指定的实验室)做复检或鉴定。阳性结果应在6h内向上级主管部门及发病地的卫生行政机关报告。 SN/T 1243—2003附录A(资料性附录)黄热病检验常用器材A. 1细胞培养用器材培养瓶;培养管：橡皮塞；-橡皮管；-37℃恒湿培养箱；塑料凝集盘,-聚苯乙烯微量反应板；普通显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜；一二氧化碳培养箱；-负压抽滤瓶及电动真空泵;-10 μL～100 μL可调式微量加样器及塑料尖吸头，蒸馏水器：普通金属重(双)蒸馏器、玻璃蒸馏器或离子交换纯水器，层流式超净工作台（双人），高压蒸汽无菌器（手提式）。A.2 鸡胚培养用器材孵育箱;-检卵箱，一卵盘;开卵钻。A.3动物试验用器材及药品设备与器材：一普通无菌室、无菌罩、超净工作台、组织研磨器、组织捣碎机、兽用采血针头；药品-麻醉剂;消毒剂;-抗生素、青素、链素、二性素 B。A.4血清学实验用主要器材-96孔微量滴定板；-25ul、50μL、100μL定量加样器及塑料尖吸头微型混和器、涡旋振荡器；-37℃及56℃水浴箱*电动离心机（4000r/min）；普通冰箱，酶标检测仪、洗板机；荧光显微镜及低温（一20℃)冷冻切片机：Y计数仪等：-PCR仪。3 SN/T 1243-2003附录B(资料性附录)黄热病检验常用溶液及配制B. 1 细胞培养液B. 1.1 基础营养液Eagle、MEM、TC199.RPMI1640,按说明书使用。B. 1. 2 完全培养液取基础营养液再添加5%～10%的新鲜胎牛血清(