LS_T 6122-2017粮油检验 粮油及制品中黄曲霉毒素含量测定 柱后光化学衍生高效液相色谱法.pdf

ICS 67.060x 11LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T6122—2017粮油检验粮油及制品中黄曲霉毒素含量测定柱后光化学衍生高效液相色谱法Inspection of grain and oils—Determination aflatoxin content in grains and oilsCleanup by immunoaffinity chromatography and determination by high-performanceliquid chromatography and post-column photochemical derivatization2017-10-27发布2017-12-20实施国家粮食局发布 LS/T 6122—2017前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草，本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口。本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、北京市粮油食品检验所、潮北省粮油食品质量监测站、北京中检维康技术有限公司、北京农业质量标准与检测技术研究中心。本标准主要起草人：王松雪、王雄、员琴、熊宁、谢刷、黎睿、张艳、张落、周明慧、陆安祥。 LS/T油检验粮油及制品中黄曲霉毒素含量测定柱后光化学衍生高效液相色谱法1范围本标准规定了柱后光化学衍生高效液相色谱法测定粮食和食用植物消中黄曲幕毒索含量的原理、试剂和材料、仅器和设备、扦样、试样制备、操作步像、结果计算和精密度。本标准适用于粮油及制品中黄曲霏毒素含量的测定（油料除外），本标准中黄曲第毒索B、Bs、G、Gs的定量检测限分别为0,5μg/kg、0.25μg/kg、1.0μg/kg和0.5 μg/kg.2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 5491根食、油料检验扦样、分样法GB/T 5524动植物油脂扦样GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T 15687动植物油脂试样的制备3原理试样由甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释和免疫亲和层析柱净化后，用高效液相色诺进行分离，利用色谱柱后的光化学得生器使分高物发生衔生反应，产生荧光信号，通过荧光检测器测定荧光强度，采用标准曲线法计算样品中黄曲需毒素的含量，4试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水应符合GB/T6682中一级水的规定。4.1乙睛：色谱纯。4.2甲醇；色谱纯。4.3氯化钠（NaCI)，4.4甲醇+水(7+3)，取70mL甲醇(4.2)加30mL水，4.5甲醇+乙睛十水(35+10+55)：取35mL甲醇(4.2)和10mL乙腈（4.1)加55mL水，4.6黄曲幕毒索标准品（黄曲霉毒索B,、B,、G;、G,）：纯度≥99%。4.7黄曲需毒索标准储备溶液：准确称取适量黄曲著毒索标准品（4.6)，用乙睛（4.1)或甲醇（4.2)分别配制2μg/mL的黄曲群毒索B,、B.G、G；标准储备液，保存于4℃备用，有效期3个月。注：考虑到黄曲零毒索具有致癌性，用粉求配制标准储备液在安全以及量值保降方面有很多不确定因素，建议直接购买育品化的黄曲需毒索标准游减。4.8黄曲露毒索混合标准工作液：准确移取适量的黄曲毒毒素B,、B;、G、G；标准储备溶减（4.7)，用 LS/T 6122—2017甲醇十乙睛十水（4.5)定容为混合标准工作液。系列混合标准工作液中B，浓度分别为0.5μg/L、1.0 μg/L,5.0 μg/L,10.0 μg/L,20.0 μg/L,50.0 μg/L，B、G、G,浓度以B,浓度为基础,按 4 : 1 : 4 : 1(B,B,G,G,)比例配制。5仪器和设备5.1玻璃纤维滤纸：直径11cm，孔径1.5μm，5.2容量瓶：2mL.5.3玻璃注射器：20mL，5.4微量注射器：100L。5.5黄曲霉毒索免疫亲和柱：柱容量≥200ng，回收率≥85%。5.6样品筛；20目筛网，孔径0.850mm，5.7粉碎机。5.8高速均质器：18 000 r/min~22 000 r/min。5.9空气压力泵，5.10振荡器。5.11光化学衍生器：紫外灯，254nm，连接于色谱柱后，出口端与荧光检测器相连，5.12分析天平；感量0.01g.5.13高效减相色谱仪：具有360nm激发波长和420nm发射波长的荧光检测器。6扦样所取样品应具有代表性，并且在运输和贮存的过程中无摄坏或变质。扦样方法推养采用GB/T5524和GB/T5491。7试样制备用粉碎机（5.7)粉碎谷物类样品使其全部通过20目样品筛（5.6)，混匀，装入洁净容器内作为试样，密封备用。