SNT 1723.2-2006马铃薯金线虫检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1723.2--2006马铃薯金线虫检疫鉴定方法Inspection and identification of gloden potato cyst nematodeGlobodera rostochiensis (Wollenweber)Behrans2006-01-26 发布2006-08-16实施中华人民共和国发布医注 1015 4国家质量监督检验检疫总局数码防伤 SN/T 1723. 2--2006前 言SN/T1723分为两部分：马铃薯白线虫检疫鉴定方法；马铃薯金线虫检疫鉴定方法。本部分为SN/T1723的第2部分。本部分的附录C是规范性附录，附录A和附录B均为资料性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中国检验检疫科学研究院。本部分参加起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。本部分起草人：葛建军、姜丽、沈培垠、周虹。本部分系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1723. 2—2006马铃薯金线虫检疫鉴定方法1范围SN/T1723的本部分规定了进境植物检疫中马铃薯金线虫检疫的基本原则，以及检疫鉴定方法。本部分适用于输华的马铃薯种薯、食用马铃薯、带根、土的茄属植物及其他带根、土的植物繁殖材料中马铃薯金线虫的检疫鉴定。2符号下列符号适用于SN/T1723的本部分。测计的线虫样本数目nL-虫体体长(μm或 mm)S.-一口针长度(μm)S,交合刺长度(μm)3原理马铃薯金线虫 golden potato cyst nematode学名:Globodera rostochiensis(Wollenweber,1923)Behrans, 1975异名: Heterodera schachti rostochiensis Wollenweber,1923Heterodera schachtii solani Zimmermann,192?英文名: golden potato cyst nematode; yellow potato cyst nematode;golden nematode分类地位：线虫门（Nemata或Nematoda）、垫刃目（Tylenchida）、异皮线虫科（Heteroderidae）、球胞囊线虫属（Globodera）。马铃薯金线虫的侵染循环、传播途径、寄主范围、生物学和形态学特征是其检疫鉴定方法的依据。马铃薯金线虫的寄主范围、分布、生活史和传播途径参见附录A。4仪器、用具及药品4.1仪器、用具光学显微镜、解镜、恒温箱、漂浮简、20目网筛、60目网筛、100目网筛、500目网筛、酒精灯、烧杯、1 000 mL三角瓶、毛笔、毛刷等。4.2药品酒精、丁香油、过氧化氢、中性树胶、福尔马林（40%）、冰乙酸、甘油、三乙醇胺、乳酚油、硫酸镁、蒸馏水等。5现场检疫与抽样5.1现场检疫检查马铃薯种薯、食用马铃薯薯块的带士情况，肉眼观察薯块基本不带土壤，则对进境的马铃薯薯块进行随机抽样，带回实验室检验；肉眼观察发现薯块带有土壤，应将带有土壤的所有薯块带回实验室进行检查。查看带根、土的茄属植物及其他带根、土的植物繁殖材料的带土情况，收集上述植物繁殖材料和运输工具上可能携带的土壤，连同植物繁殖材料一并带回实验室检查。1 SN/T 1723. 2—20065.2抽样5.2.1抽样方式棋盘式或五点式随机抽样。抽样时应注意上、中、下层的代表性。5.2.2抽样比例以品种为单位，按总件数的10%抽样，每件按种薯总数的5%～10%抽样。6实验室检验6.1土壤的收集使用毛刷将马铃薯等块茎和根上的土壤刷下来，尤其注意收集薯眼等内凹表面的土壤；若马铃薯种薯等繁殖材料的带土量极小，可使用少量水将块茎沾附的少量士洗刷下来。6.2线虫的分离与鉴定6.2. 1 Fenwick-Oostenbrink 漂浮法此方法般用于检验100g以上的泥土。具体的分离步骤如下：将现场采集到的土样铺于干净的浅瓷盘内，置于通风无阳光处风于，用手(或用小的圆木棍)将泥土轻轻压碎,用孔径为3mm 的标准筛过筛，除去泥土中混杂的植物组织和粗砂等杂物后备用;将漂浮筒和下筛淋湿;漂浮简内灌满清水;在上筛中放置风干的土壤样品100g左右，用强水流冲洗，使土样全部被淋洗至漂浮简内；进人简内的土粒因较重而逐渐下沉，而较轻的胞囊和一些有机杂物则陆续向上漂浮，经1min～2 min后漂浮于筒口水面之上;再由上筛加水至漂浮筒内;使漂浮于筒口的胞囊和杂物沿水槽流到下筛(100目）上面；将下筛内含胞囊的残留物冲洗至1000mL的三角瓶内，往瓶内加清水，直至瓶口处；静置片刻，待漂浮物浮于液面时，将漂浮物倒人装有滤纸的漏斗中过滤，待滤纸晾干后即可镜检。6.2.