SN 1615-2005食品和动物饲料中嗜冷微生物计数方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1615—2005/ISO 17410:2001食品和动物饲料中嗜冷微生物计数方法Microbiology of food and animal feeding stuffs-Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms(ISO 17410:2001,IDT)2005-08-18 发布2006-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1615-2005/ISO 17410:2001前言本标准等同采用ISO17410:2001《食品和动物饲料微生物学-—-嗜冷微生物计数方法》英文）。为便于使用，本标准做了下列编辑性修改：a)“‘本国际标准”一词改为‘本标准’。b)用小数点‘，代替作为小数点的逗号‘，。c）删除国际标准的前言。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局本标准主要起草人：江志毅、杨相莹、李志培、张巨洲、苗丽。本标准是首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/TISO 17410 : 2001食品和动物饲料中嗜冷微生物计数方法1范围本标准规定了嗜冷微生物6.5℃菌落计数方法。本标准适用于食品和动物饲料中嗜冷微生物的计数。2 规范性引用文件下列引用标准中的条款通过本文的引用而成为本标准的条款。对于注明日期的引用标准，其后的任何更改或修订版均不适用；然而，鼓励基于本标准的协议各方探讨使用下述引用标准必威体育精装版版本的可能性。对于未注明日期的引用标准,其必威体育精装版版本是适用的。ISO6887-1食品和动物饲料微生物学-—微生物学检测样品的准备包括初始悬液和十倍稀释液第一部分：样品初始悬液和十倍稀释液的制备通则ISO7218食品和动物饲料微生物学-—微生物学检验通则ISO8261牛奶和牛奶制品-——-微生物学检验样品的制备和稀释3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1晴冷微生物 psychrotrophic microorganisms在本标准特定条件下形成可计数菌落的细菌、篝菌和酵母菌。4原理4.1用非选择性固体培养基制做两个琼脂平板，如果原产品是液体，用规定量的试验样品原液，其他产品用规定量的试验样品初始悬液，为避免受热力影响，采用表面接种。在相同条件下，每一稀释度试验样品分别接种两个琼脂平板。4.2将平皿放人6.5℃培养箱中有氧培养10d。4.3以从琼脂平板上获得的菌落数来计算每毫升或每克样品中的微生物数量。5培养基和稀释液现行的实验室操作，可按ISO7218进行。除另有规定外，所有试剂均为分析纯级，水为蒸馏水，去离子水或纯净水。如果已准备好的培养基和试剂不能立刻使用，除另有说明外，可储藏在3℃士2℃的暗环境中，在培养基成分不发生任何改变的前提下储藏期不超过一个月。5. 1稀释液见 ISO 6887-1 。5.2平板计数琼脂(PCA)5.2.1成分蛋白陈5.0 g1 SN/T 1615—2005/ISO 17410 :20012.5 g酵母浸膏1.0 g葡萄糖9 g～18 gl)琼脂水1 000 mL做奶制品检测时，建议每升培养基中加人1.0g脱脂奶粉，此奶粉中不应含有抑菌物质。5. 2. 2制备用水溶解各成分或脱水合成培养基，必要时可加热。彻底搅拌均匀后静置数分钟。必要时调整pH值(6.9),使灭菌后的培养基在25℃时 pH值为 7.0±0.2。将适量的培养基装人三角烧瓶或瓶子中(6.10),放人高压灭菌器中（6.1)121℃灭菌15min。如果培养基需要立即使用，用之前可将其放人44℃～47℃水浴箱中(6.7)冷却。否则，允许将培养基凝固在三角烧瓶或瓶子中。使用之前将其放在沸水中使培养基完全融化，再放人44℃～47℃水浴箱(6. 7)冷却。每-个培养血中(6.5)加人大约15mL.已制备好的培养基，凝固后使用。在使用刚制备好的琼脂平板之前，先仔细将其表面干燥（合适的做法是打开平皿盖，琼脂表面朝下）,放人37℃～55℃的培养箱内(6.3)直到琼脂表面于燥，也可将培养血半开盖放置在层流安全柜中30 min或加盖过夜。6仪器和玻璃器血通用要求见ISO7218。玻璃器血可选择相似规格，微生物实验室设备要求如下。6.1 高压灭菌器:可操作温度为 121℃。6.2干热灭菌器：可操作温度在170℃～175℃,时间为1h。6.3培养箱：可操作温度为 37℃～55℃。6.4培养箱：可操作温度为6.5℃±1℃。6.5培养血：玻璃或塑料制品均可使用,直径约为 90 mm～100 mm。6.6 吸管;经过校准的有微量刻度的吸管,0.1 mL、1 mL 和 10 mL。6.7水浴箱:或类似装置,其中一