SN_T 4780-2017出口食品腐败酵母菌实时荧光PCR检测方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4780—2017出口食品腐败酵母菌实时荧光PCR检测方法Detection of spoilage yeasts in food for export-Real-time PCR method2017-05-12发布2017-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局亲层子 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口食品腐败酵母菌实时荧光PCR检测方法SN/T4780—2017*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16印张0.75字数18千字2018年2月第一版2018年2月第一次印刷印数1—500?书号：155066·2-32783定价16.00元 SN/T 4780—2017前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：付溥博、郭铮蕾、韩玥、徐姗、饶红、王传现、刘夏、李晓虹。 SN/T4780—2017出口食品腐败酵母菌实时荧光PCR检测方法1范围本标准规定了出口食品中鲁氏结合酵母菌（Zygosaccharomycesrourii）、酿酒酵母菌（Saccharo-mycescerevisiae）和酒香酵母菌（Brettanomycesspp.）的实时荧光PCR检测方法。本标准适用于出口食品中鲁氏结合酵母菌、酿酒酵母菌和酒香酵母菌的实时荧光PCR检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27403实验室质量控制规范汇食品分子生物学检测3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1腐败酵母菌Spoilageyeasts腐败酵母菌是指在食品中生长而引起食品腐败变质的一类酵母菌。腐败酵母菌会分解食品的糖、胶质、淀粉和脂肪，产生二氧化碳、硫化物，或引起食物酸化，从而导致食品腐败。鲁氏结合酵母菌、酿酒酵母菌和酒香酵母菌均为重要的导致食品腐败的酵母菌。3.2鲁氏结合酵母菌Zygosaccharomycesrouxil鲁氏结合酵母菌（Zygosaccharomycesrouri）属于掷孢酵母科，鲁氏结合酵母属。鲁氏结合酵母菌在麦芽汁琼脂上菌落呈奶油色，稍有光泽，质地软而平滑，卵形或球形。注：鲁氏结合酵母菌是最常见的嗜高渗透压酵母菌。既是主要传统发酵食品的生产菌，又是引起某些低水分活度食品及原料的腐败菌。如：鲁氏结合酵母菌是生产酱油、日本味噜和泰国发酵鱼制品等发酵制品的重要菌种。在果汁、果酱、软饮料、沙拉酱和调味番茄酱等中则是腐败菌。3.3酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母菌（Saccharomycescerevisiae）属于酵母菌科，酿酒酵母菌属。单细胞，卵圆形或球形，具细胞壁、细胞质膜、细胞核、液孢、线粒体。细胞大小为2.5μm~10μm×4.5μm~21μm。酿酒酵母菌在孟加拉红培养基上光滑、湿润，呈红色、粉红或白色蜡样菌落，常带黏性。酿酒酵母菌又称面包酵母或者出芽酵母，常常存在于蔬果汁饮料中，从而引起饮料的腐败。1 SN/T4780—20173.4酒香酵母菌Brettanomycesspp.酒香酵母菌（Brettanomycesspp.）属于隐球酵母菌科，酒香酵母菌属。酒香酵母菌的菌落特征为乳白色、圆形、中央凸起、边缘扁平、表面湿润光泽、粘稠易挑起，有轻微的酱香味，主要以出芽方式繁殖。注：酒香酵母菌属中的布鲁塞尔酒香酵母菌（Brettanomycesbrurellensis）会引葡萄酒风味劣变。在酿造葡萄酒过程中，酒香酵母菌在酒体中产生的4-乙基苯酚（4-Ethylphenol，4-EP）和4-乙基愈创木酚（4-Ethylguaiacol，4-EG)，能产生一种典型的“马厥味”不良风味。在低浓度时，这些物质可以对葡萄酒的香气产生有利的影响，增加许多特别的风味，但浓度一旦变高，就会产生不愉快的气味，降低葡萄酒的香气和口感，影响葡萄酒的经济价值。4缩略语下列缩略语适用于本文件。PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）Ct值：循环值（Cyclethreshold)DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonulei