QB_T 5450-2019口腔清洁护理用品 牙膏中连翘苷的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 71.100.40QB分类号：Y43中华人民共和国轻工行业标准QB/T5450—2019口腔清洁护理用品牙膏中连翘苷的测定高效液相色谱法Oral care and cleansing products - Determination of phillyrin in toothpastes -High performance liquid chromatography2019-12-24发布2020-07-01实施发布中华人民共和国工业和信息化部 QB/T5450-2019前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位：广州立白企业集团有限公司、天津蓝天集团股份有限公司、黑龙江省轻工科学研究院、广州质量监督检测研究院、浙江方圆检测集团股份有限公司。本标准主要起草人：刘都树、刘佳乐、李少林、张欣、沈兆雷、郭长虹、胡丹。本标准为首次发布。 QB/T5450—2019口腔清洁护理用品牙膏中连翘苷的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中连翘苷含量的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。本标准适用于牙膏中连翘苷含量的测定。注：本标准连翘苷的检出浓度为0.12ug/mL，定量浓度为0.40ug/mL。若取5.0g牙膏样品，定容至25mL，连翘苷的检出限为0.60mg/kg，定量限为2.00mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法要点将牙膏用80%甲醇水溶液分散，采用磁力搅拌器和超声波法提取其中的连翘苷成分，离心分离，然后过滤处理，滤液用带紫外检测器的高效液相色谱仪分析测定，通过峰面积外标法定量计算。4试剂与标准物质4.1一般规定除非另有说明，所用试剂均为分析纯的试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.2乙腈色谱纯。4.3连翘苷对照品纯度≥97%，CAS号：487-41-2。4.4无水甲醇分析纯。4.5稀释液80%甲醇水溶液：用无水甲醇（4.4）和水按8：2（体积分数）混合均匀，备用。4.6标准储备液称取连翘苷对照品（4.3）10mg（精确至0.0001g），置于250mL容量瓶中，加入200mL稀释液（4.5）溶解，超声处理5min，冷却至室温，并用稀释液（4.5）定容至刻度，混匀后，得到标准连翘苷储备溶液浓度为40.0μg/mL。4.7标准工作液吸取标准储备液（4.6）1.0mL、2.0mL、4.0mL、8.0mL、10.0mL于50mL容量瓶中，用稀释液（4.5）定容至刻度，混匀后，得到浓度为0.8μg/mL、1.6ug/mL、3.2μug/mL、6.4μg/mL、8.0μg/mL的系列标准工作溶液。4.7有机相滤膜0.45 μm。4.8相滤膜0.45 μm。 OB/T5450-20195仪器高效液相色谱仪：配紫外检测器（或性能相当检测器）。5.15.2分析天平：精度0.0001g。5.3磁力搅拌器。5.4超声波清洗器，工作频率≥35kHz，功率≥200W。5.5高速离心机，≥10000r/min。5.6反相C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），或性能相当色谱柱。6分析步骤6.1试样处理先将牙膏样品挤去大约20mm，准确称取牙膏样品5.0g（精确至0.0001g）置于25mL容量瓶中，加入15mL稀释液（4.5），加入磁子磁力搅拌至牙膏分散均匀，取出磁子（用4.5稀释液清洗干净磁子，将清洗液合并至容量瓶中），然后用稀释液（4.5）定容至刻度。继续加入磁子用封口膜密封容量瓶口，磁力搅拌5min，超声处理30min（每间隔10min将样液混合均匀）后，将样液于10000r/min离心分离2min。上清液经0.45um有机相滤膜（4.8）过滤，备用。6.2测定6.2.1色谱条件参考按照表1设定液相色谱条件。表 1 液相色谱条件仪器参数设定值进样量/μL20流量/(mL/min)1.0运行时间/min30柱温/℃35紫外检测器波长/nm2776.2.2流动相用梯度洗脱方式分析，洗脱程序见表2。表2流动相洗脱条件时间/min流量/(mL/min)水/ (%)乙腈/(%)0.001.0025.075.017.001.0025.075.018.001.0090.010.025.001.0090.010.026.001.0025.075.030.001.0025.075.0梯度洗脱条件可根据不同实验室目标峰出峰时间作相应调试。乙腈和水