WST 49-1996尿中苯酚的气相色谱测定方法 （一）液晶柱法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中苯酚的气相色谱测定方法WS/T 49---1996（一）液晶柱法Urine--Determination of phenol--Gaschromatographic method--I Liquid crystal column1主题内容与适用范围本标准规定了尿中酚的气相色谱测定方法（一）液晶柱法。本法最低检测浓度为0.1mg/L。本标准适用于正常人和接触苯及接触苯酚和甲酚工人尿中对、邻、间甲酚的测定。2原理尿样经加热酸解，乙醚萃取出苯酚，经液晶PBOB柱将苯酚及邻、间、对位甲酚分离后，用氢焰离子化检测器检测，以保留时间定性，内标法峰高比定量。3仪器3.1气相色谱仪、氢焰离子化检测器。3.2电热恒温水浴。3.3冰壶。3.4容量瓶，50mL。3.5具塞离心管；或具塞试管，10mL。3.6聚乙烯塑料瓶，150mL。3.7微量注射器，10μL。3.8尿比重计。4试剂本标准所用试剂除另有说明者外均为分析纯级。4.1实验用水：重蒸馏水或具同等纯度的去离子水。4.2盐酸,P2o=1.19 g/mL。4.3无水乙醚。4.4二氯甲烷（用作固定液溶剂）。4.5固定液：液晶-双-(对-辛氧基苯甲酸)对苯二酚酯(PBOB)。4.6担体:Chromosorb W-AW-DMCS,80~100目。4.7苯酚标准溶液：称取0.0250g苯酚，溶于少量蒸馏水中，将此溶液转移至50mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液1mL=500μg苯酚，为标准贮备液。取贮备液用水稀释成1mL=100μg苯酚为标准应用液。1997-05-01实施中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 WS/T 49—19964.8内标（硝基苯）溶液：称取0.0250g硝基苯，溶于蒸馏水中，转移至50mL容量瓶中，加水至刻度，此溶液1mL=500μg硝基苯。4.9质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶收集约50mL班末尿，尽快测定比重，于室温下运输，夏季运输时最好冷藏，置4℃冰箱中存放可保存两周。6分析步骤6.1仪器操作条件色谱柱：柱长2m，内径3mm，不锈钢或玻璃柱。担体：固定液：磷酸：载体=15：0.5：100。150℃通氮气老化8h。柱温：每次实验开始，在140℃恒温1h，降至112℃稳定后工作。汽化室温度：180℃。检测室温度：160℃。载气：氮气，20mL/min。6.2样品处理取5mL尿样（5)于具塞试管中，加入1mL盐酸，摇匀，加塞。于90℃水浴恒温1h后，取出冷至室温，加0.2mL内标溶液（4.8），加水稀释至10mL，放冰水浴冷至0℃（约5min）。各加3mL乙醚，加塞振摇1min。静置分层，必要时离心。6.3标准曲线的绘制6.3.1取7只10mL具塞试管，分别加入0,0.25，0.50，1.0,2.0，4.0,6.0mL苯酚标准应用液（4.7），各加水（4.1)至6mL，然后分别加入0.2mL内标溶液（4.8），1.0mL盐酸（4.2），并加水至10mL刻度，摇匀。此时标准管系列中苯酚浓度分别为0，2.5，5.0，10.0，20.0，40.0，60.0mL/L。6.3.2上列标准管各加3.0mL无水乙醚，加塞振摇1min后，静止分层，取5μL乙醚萃取液进样测定。以苯酚浓度（mg/L)为横坐标，苯酚峰高与内标峰高比为纵坐标，绘制标准曲线。68101 C2146时间，min酚的混合标样色谱图1—苯酚；2-邻甲酚；3一间甲酚;4-对甲酚 WS/T49—19966.4样品测定取经处理的样品乙醚液（6.2)5μL，进气相色谱仪测试。见上图。根据测得的苯酚峰高与内标峰高比值查标准曲线，再根据公式进行计算。7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数(k)。1. 020 - 1. 000k=卖测比重-1. 000.(1)7.2按式(2)计算尿中苯酚的浓度。X=X10 .k(2 )V式中：X-尿中酚的浓度,mg/L;c——由标准曲线查得的苯酚浓度，mg/LV尿样体积，mL；10—尿样处理时加水至10mL体积。8说明8.1本标准尿液中最低检测浓度为0.1mg/L（检测限1.25ng），标准曲线线性范围0~60mg/L（苯酚量0~1000mg）；精密度CV=1.0%~3.1%（酚浓度为5~40mg/L，n=6）；加标回收率为77.5%~81.0%（尿样本底浓度为6.9~34.0mg/L，加标量10~40mg/L，n=6）。8.2对正常人，一般都取晨尿分析。对接触者因开始接触苯后尿酚浓度迅速上升，脱离接触后又很快下降，故取班末尿为宜。采集尿样时应注意防止污染。采样后测量比重，尽快运回实验室，如暂不进行分析需存放在4℃冰箱中。8.3本法采用酸解法处理样品，同美国NIOSH采