SN 0858-2000进出口花粉中色氨酸的测定方法.pdf

中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T出口花粉中色氢酸的测定方法Method for the determination of tryptophanin pollen for import and export2000- 06- 22 发布2000-11-01实施中华人民共和国国家出人境检验检疫局‧发 布 SN/T 0858—2000前 言本标准是按照GB/T1.1--1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标编写的基本规定》编写的。本标准是对原专业标准ZBX83004一1988《出口花粉中色氨酸的测定方法》的修订。本标准从实施之日起，同时代替ZBX83004—1988。本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：蔡则慈。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T 0858—2000进出口花粉中色氢酸的测定方法代替 ZB X83 004—1988Method for the determination of tryptophanin pollen for import and export1 范围本标准规定了用荧光分光光度计测定色氮酸含量的方法。本标准适用于进出口花粉中色氨酸含量的测定。2测定方法2.1方法提要花粉中蛋白质经高温真空碱法水解后，利用色氨酸的天然荧光，在激发波长280nm，发射波长368nm处测定其荧光强度，用标准曲线法定量。2.2试剂除有特殊要求外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。2.2.10.005mol/L氢氧化钠溶液：新鲜配制。2.2.2L-色氨酸标准品：纯度≥99%。2.2.30.100mg/mL色氨酸标准溶液：准确称取25.0mgL-色氨酸，置于250mL容量瓶中，加入0.005mol/L氢氧化钠溶液，溶解后稀释到刻度。2.2.4可溶性淀粉。2.2.5氢氧化钠溶液：5mol/L。2.2.6淀粉氢氧化钠溶液：称取0.5g可溶性淀粉，溶于100mL微热的5mol/L氢氧化钠溶液中，新鲜配制。2.2.74mol/L尿素溶液；调节pH值为11,新鲜配制。2.2.8 6 mol/L 盐酸。2.3设备与仪器2.3.1荧光分光光度计。2.3.2聚四氟乙烯试管：内径10 mm,长 60 mm,壁厚1mm。2.3.3玻璃水解管：17料玻璃试管，内径14mm，长150mm。2.3.4充氮、抽真空装置：真空泵或抽气管、高纯氮气。2.4样品制备取有代表性样品，用四分法取出5g左右，粉碎使其全部通过60目筛孔，密闭保存，作为试样。称取10mg试样，准确至0.1mg，置于聚四氟乙烯试管(2.3.2)内，加入1mL淀粉氢氧化钠溶液后放入玻璃水解管（2.3.3)中，抽真空、充氮气，重复三次，最后抽真空封口，移入（145士2)℃烘箱内加热4 h，关闭烘箱,冷却后取出。打开玻璃水解管，取出聚四氟乙烯试管，用水将水解液定量转移到置于冰浴中并事先加有0.7mL中华人民共和国国家出人境检验检疫局2000-06-22批准2000-11-01实施1 SN/T 0858—20006 mol/L 盐酸的 25 mL 容量瓶内。调节溶液 pH 值至中性，用水稀释至刻度,待测定。2.5荧光测定将 2.00 mL 待测清液移入10 mL 容量瓶中,用 4 mol /L 尿素溶液稀释至刻度。随即测定其在激发波长280 nm，发射波长368 nm处的荧光强度。2.6标准曲线绘制用微量移液器分别吸取0.100mg/mL色氨酸标准溶液0,0.125,0.375,0.625和0.875mL，注入聚四氟乙烯试管内，不加入试样，其余操作同2.4和2.5。此标准系列对应色氮酸浓度为00.100，0.300,0.500和0.700μg/mL。以浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标绘制标准曲线。2.7结果计算按式(1)计算样品中色氮酸的百分含量：AXV.(1 )m×1000× 100X -式中：X一一样品中色氨酸含量，%；A-一标准曲线上查得的样液中色氨酸浓度，μg/mL;V——样品稀释最终总体积,mL;一样品质量,mg。m- 中华人民共和国出入境检验检疫行准业标进出口花粉中色氨酸的测定方法SN/T 0858--2000*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷版权专有不得翻印*开本 880X12301/16印张 1/2字数 ４千字2000年9月第一版2000年9月第一次印刷印数 1-2 000*