NY_T 3039-2016水溶肥料 聚谷氨酸含量的测定.pdf

ICS 65.080G 20NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3039—2016水溶肥料聚谷氨酸含量的测定Water-soluble fertilizers-Determination of poly-glutamic acid content2016-12-23发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T3039—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、中国农学会、中国植物营养与肥料学会、土壤肥料产业联盟。本标准主要起草人：刘蜜、韩岩松、黄均明、侯晓娜。- NY/T3039—2016水溶肥料聚谷氨酸含量的测定1 范围本标准规定了水溶肥料聚谷氨酸含量测定的氨基酸自动分析仪法试验方法本标准适用于微生物发酵而成的液体或固体聚谷氨酸水溶肥料；也适用于添加聚谷氨酸，不含硝酸根和其他有机成分的肥料。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T887液体肥料密度的测定NY/T1975水溶肥料游离氨基酸含量的测定3原理分别测定试样中经盐酸溶液水解后的和未经水解的游离谷氨酸的含量，两者之差即为聚谷氨酸含量。4试剂和材料所用试剂、水和溶液的配制，在未注明规格和配制方法时，均应符合氨基酸自动分析仪设备的要求。4.1浓盐酸。4.2盐酸溶液：1+1。4.3氢氧化钠溶液：p(NaOH）=40g/L。4.4柠檬酸钠缓冲液：pH=2.2。称取19.6g柠檬酸钠（NasCH;O，·2H2O），用水溶解并转移至1000mL容量瓶中，加人16.5mL浓盐酸（4.1），混匀，用水定容，必要时可用盐酸溶液（4.2）和氢氧化钠溶液（4.3）调节pH至2.2。过孔径0.45um水系微孔滤膜后备用。4.5乙二胺四乙酸二钠溶液:p(EDTA一2Na）=10g/L。4.6谷氨酸标准溶液。5仪器5.1通常实验室仪器。5.2氨基酸自动分析仪。5.3恒温振荡器：温度可控制在（25士5）℃，振荡频率可控制在（180士20）r/min。5.4水解管及封管装置：体积为15mL～20mL的硬质玻璃管及喷灯、真空泵或充氮气装置，或其他相同功能的装置。5.5恒温干燥箱：温度可控制在（110土2)℃。5.6离心机（10000r/min以上），或水系微孔滤膜（孔径0.45μm)及过滤器、注射器。5.7蒸干装置：试管浓缩仪或其他相同功能的装置。6分析步骤6.1试样的制备1 NY/T3039—2016固体样品缩分至约100g，将其迅速研磨至全部通过0.50mm孔径试验筛（如样品潮湿，可通过1.00mm试验筛），混合均匀，置于洁净、干燥容器中；液体样品经摇动均匀后，迅速取出约100mL，置于洁净、干燥容器中。6.2试样溶液的制备称取0.5g～50g（精确到0.0001g）混合均匀的试样（以含谷氨酸37mg～184mg为佳），置于250mL容量瓶中。液体试料直接加水定容；固体试料加水约150mL，置于（25土5）℃振荡器内，在（180土20）r/min的振荡频率下振荡30min，取出后用水定容。放置至澄清后吸取上清液（或过滤后吸取滤液）1.00mL于水解管中，加入1.00mL浓盐酸（4.1)和8.00mL盐酸溶液（4.2）。封管后置于（110土2）℃的恒温干燥箱中，水解22h～24h后，取出冷却，打开水解管，将水解液于10000r/min以上离心15min或用微孔滤膜过滤。吸取上清液（或滤液）1.00mL，用蒸干装置蒸干。加入1.00mL～5.00mL的柠檬酸钠缓冲液（4.4)溶解，使谷氨酸浓度处于仪器测定的最佳浓度范围内。注：当试样中含有金属元素影响测定时，则在“打开水解管”后吸取水解液2.00mL，加人乙二胺四乙酸二钠溶液（4.5)2.00mL，混匀，然后按“于10000r/min以上离心15min或用微孔滤膜过滤..使谷氨酸浓度处于仪器测定的最佳浓度范围内。”进行操作。6.3标准曲线的绘制将谷氨酸标准溶液（4.6)稀释至100nmol/mL，上机测定。以仪器进样体积中谷氨酸的物质的量（nmol)为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，采用单点校准法绘制标准曲线。注：谷氨酸标准溶液的最佳上机浓度通常为100nmol/mL，可根据仪器要求调整。6.4试样溶液的测定将试样溶液在与测定标准溶液相同的条件下测定，在标准曲线上查出相应仪器进样体积中谷氨酸的物质的量（nmol）。7游离谷氨酸含量的测定按照NY/T1975的规定测定未经水解的试样中游离谷氨酸的含量。8分析结果的表述8.1水解后游离谷氨酸的总含量以质量分数1计，数值以百分率表示，按式(