SNT 2224-2008进出口动物源性食品中利福西明残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2224—2008进出口动物源性食品中利福西明残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of rifaximin residue in foodstuffs of animal originfor export and import---LC-MS/MS method2008-11-18 发布2009-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局胞素管均质化数码防伪 SN/T 2224-2008前言本标准的附录 A和附录 B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：李一尘、林维宣、康庆贺。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2224—2008进出口动物源性食品中利福西明残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了动物源性食品中利福西明残留量的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛奶中利福西明残留量的检测和确证。2 规范性引用下列文件中的条款通过本标的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注明凸期的引用文伴，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。（GB/6682—2008,ISO3696:1987，MOD)3方法提要样品中利福西明残留物用乙腈緹取，正已烷除去提取液中脂舫，固湘萃取柱净化，洗脱液氮气吹干后，用液相色谱串联质谱测定，外标定量。试剂和材料46682规定的除另有说明外，所用试剂均为分析组4.1乙腈：高效液相色谱级。4.2正已烷：高效液相色谱级。4.3异丙醇。4.4甲酸：高效液相色谱级。4.5无水硫酸钠：650℃灼烧4h置于≠燥器中备用。4.6乙腈饱和正已烷：100mL乙睛中加入100mL正已烷，充分振荡店，静置分层，取上层液体。4.70.1%甲酸溶液：准确量取1m甲酸(4.4)于1L容量瓶中,用永定容至1L。4.8乙腈-水溶液（40+60,体积比）：量取40mL乙腈加人6bml永中混匀。4.9利福西明标准品（Rifaximin，CAS No.80621-81-4）：纯度大于等于95%。4.10利福西明标准储备溶液：称取约0.01g利福西明标准品（精确至0.0001g），用乙腈溶解定容至100 mL，此标准溶液浓度为100 μg/mL，置于一18℃冰箱避光保存。保存期半年。4.11利福西明标准工作溶液（1.0μg/mL）：吸取适量的利福西明标准储备溶液（4.10），用乙腈配成1.0ug/mL的标准工作溶液。标准工作溶液置于4℃避光贮存。4.12固相萃取小柱:Waters oasisHLB柱,500 mg,6 mL,或相当者。4.13微孔滤膜：0.45um，有机相。5仪器和设备5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2组织捣碎机。 SN/T 2224—20085.3分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。5.4旋转蒸发器。5.5固相萃取装置。5.6 离心机:4 000 r/min。5.7旋涡混合器。5.8均质器。10 000 r/min。6　样品制备与保存6.1 猪肉、猪肝和猪肾取约500g代表性样品，用组织捣碎机充分捣碎，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记。6.2牛奶所取约500g样品，充分均匀，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记。6.3样品保存猪肉、猪肝和猪肾试样于一18℃以下冷冻避光存放。牛奶试样于0℃～4℃冷藏避光存放。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1　提取称取5g试样（精确至0.01g)于50mL具塞离心管中,加人5g无水硫酸钠（4.5)和20mL乙腈（4.1）,均质30 s,4000r/min离心5min，将上清液转移至另一50 mL离心管中，用玻棒捣碎离心管中的沉淀。加人10 mL乙腈提取,旋涡混合1min，4 000 r/min离心5 min，合并上清液。加入 10 mL乙腈饱和正已烷（4.6），振荡5min，静置10 min。收集下层液体于100 mL浓缩瓶中，加人10mL异丙醇，40℃旋转蒸发至干,用3mL乙腈溶解，待净化。7.2　净化用5mL乙睛淋洗固相萃取柱（4.12），将提取液（7.1）上柱，控制洗脱流速为1mL/min，收集流出液于10mL试管中。再用5mL乙腈洗柱，控制洗脱流速为1 mL/min，合并洗脱液，于45℃下氮气吹干，用乙腈水溶液（4.8)溶解定容至1.0