WS 281-2008狂犬病诊断标准.pdf

ICS 11.020C5923222-2008WS中华人民共和国卫生行业标准WS 281-2008狂犬病诊断标准Diagnostic criteria for rabies2008-02-28 发布2008-09-01实施中华人民共和国卫生部发布PM:水淋 WS 281-2008前言根据《中华人民共和国传染病防治法》制定本标准按照国家质检总局国家标准委公告（2005年第146号），GB17014一1997《狂犬病诊断标准及处理原则》自本标准实施之日起废止。本标准的附录A是规范性附录，附录B、附录C、附录D是资料性附录。本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出。本标准由中华人民共和国卫生部批准。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所、山东省疾病预防控制中心、泸州医学院附属医院、武汉生物制品研究所、中国疾病预防控制中心疾病控制与应急处理办公室。本标准主要起草人：唐青、王显军、余光开、严家新、许真。 Ws 281—2008狂犬病诊断标准1 范围本标准规定了狂犬病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。本标准适用于全国各级医疗卫生机构及其工作人员对狂犬病的诊断、报告。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2.1狂犬病街毒street virus自然状态下从感染动物或患者中发现的狂犬病病毒。2.2狂犬病实验室固定毒fixedvirus狂犬病街毒株经过动物或细胞系列传代适应特定宿主后，其致病性减弱。3诊断依据3.1流行病学史有被犬、猫、野生食肉动物以及食虫和吸血蝙蝠等宿主动物咬伤、抓伤、舔黏膜或未愈合伤口的感染史。3.2临床表现3.2.1狂躁型狂躁型是我国最常见的类型。主要表现有：在愈合的伤口及其神经支配区有痒、痛、麻及蚁走等异常感觉，以后出现高度兴奋、恐水、怕风、阵发性咽肌痉挛和交感神经兴奋症状如流涎、吐沫、多汗、心率加快、血压增高等。逐渐发生全身弛缓性瘫痪，最终因呼吸、循环衰竭而死亡。3.2.2麻痹型麻痹型在我国较为少见。临床表现为：前驱期多为高热、头痛、呕吐及咬伤处疼痛等，无兴奋期和恐水症状，亦无咽喉痉挛和吞咽困难等表现。前驱期后即出现四肢无力、麻痹症状，麻痹多开始于肢体被咬处，然后呈放射状向四周蔓延。部分或全部肌肉瘫痪，咽喉肌、声带麻痹而失音，故称“哑狂犬病”。3.3实验室检查3.3.1直接荧光抗体法(dFA)见A.1)或ELISA(见A.2)检测患者唾液、脑脊液或颈后带毛囊的皮肤组织标本中狂犬病毒抗原阳性，或用RT-PCR(见A.3）检测狂犬病病毒核酸阳性。3.3.2细胞培养方法（见A.4)从患者唾液、脑脊液等标本中分离到狂犬病病毒。3.3.3脑组织检测尸检脑组织标本，用直接荧光抗体法（dFA)（见A.1)或ELISA（见A.2）检测狂犬病病毒抗原阳性、RT-PCR(见A.3)检测狂犬病病毒核酸阳性、细胞培养方法(见A.4)分离到狂犬病病毒。4诊断原则根据患者的流行病学史、临床表现和实验室检查结果进行综合判断，病例确诊需要实验室证据。狂犬病的病原学、流行病学和临床表现参见附录D,狂犬病特异性抗体检测参见附录B。1 WS 281—20085 诊断5. 1临床诊断病例符合下列任一项即可诊断：5. 1. 1 符合 3. 2. 1 者。5.1.2符合3.1加3.2.2者。5.2确诊病例临床诊断病例加3.3.1、3.3.2、3.3.3中的任何一项者。6鉴别诊断本病尚需与狂犬病恐怖症、破伤风、病毒性脑膜脑炎、脊髓灰质炎等鉴别，参见附录C。2 WS 281—2008附录A（规范性附录）狂犬病特异性病原学检测A.1直接荧光抗体方法(dFA)检测狂犬病病毒抗原A.1.1原理感染狂犬病病毒的细胞携带狂犬病病毒抗原，狂犬病病毒抗原可以特异性与FITC标记的抗狂犬病病毒单克隆抗体结合。FITC在荧光显微镜下显示可见荧光，从而使抗原抗体之间的特异性反应通过荧光显微镜可以直接观察到。直接荧光抗体方法既快速、特异又敏感，是诊断狂犬病病毒感染的首选方法。A.1.2试验材料A.1.2.1可用于狂犬病患者诊断的标本：受伤处皮肤组织、角膜、后颈带毛囊的皮肤组织和体液（唾液、脑脊液等）；狂犬病患者死亡后用于诊断的标本：脑组织。A.1.2.2FITC标记的抗狂犬病病毒单克隆抗体。A.1.2.3常用稀释液：pH7.2～7.4PBS、1：60000伊文思蓝(PBS稀释）、90%甘油(PBS配制)等。A.1.2.4荧光显微镜。A.1.3检测步骤A.1.3.1患者体液标本直接涂片，组织标本涂片、印片或冷冻切片。A.1.3.2室温干燥数分钟，冷丙酮室温固定7min～10min。A.1.3.3FITC标记的抗狂犬病病毒单克隆抗体，按照使用说明稀释后，滴加在涂片、印片或切片上，37℃湿盒孵育30min。A.1.3.4PBS洗3次，每次5min。A.1.3.5荧光显微镜观