QB_T 5030-2017溶菌酶.pdf

ICS 67.180QB分类号：Y69备案号：57053-2017中华人民共和国轻工行业标准QB/T5030-2017溶菌酶Lysozyme2017-07-01实施2017-01-09发布发布中华人民共和国工业和信息化部 QB/T5030-2017前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由中国轻工联合会提出。本标准由全国食品发酵标准化中心归口。本标准起草单位：浙江艾杰斯生物科技有限公司、中国食品发酵工业研究院、大连韩伟食品有限公司。本标准主要起草人：张蔚、潘宏涛、王洪荣、王首锋、刘捷，本标准为首次发布。1 QB/T5030-2017溶菌酶范围1本标准规定了溶菌酶的产品分类、要求、试验方法、检验规则和标志、包装、运输及贮存。本标准适用于微生物源或从蛋清中经提取、精制等工艺制得的溶菌酶。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 191包装储运图示标志化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T 601GB/T 603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB 5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB 5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GB 7718食品安全国家标准预包装食品标签通则产品分类3按产品状态分为固体和液体。4要求感官要求4.1应符合表1的规定。表1感官要求要求项目固体液体状态粉末液态色泽白色至淡黄色浅黄色至深褐色杂 质无正常视力可见外来杂质4. 22理化要求应符合表2的规定。表2理化要求要求项目固体液体酶活力/[u/mg(mL))符合标示值水分/%M6灰分/%≤1.5 0.3pH3.0~7.01 QB/T5030-2017注：不同来源的溶菌酶抗菌谱范围不同，可参照附录A给出的方法验证溶菌酶对不同菌的抑菌能力。5试验方法本方法中所用的水，在未注明其他要求时，应符合GB/T6682一2008中三级水的规格，所用试剂，在未注明其他规格时，均指分析纯（AR）。分析中所用标准滴定溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T603的规定制备。5.1感官取适量试样，在自然光线下，观察试样的色泽、状态和有无外来杂质，并记录。5.2酶活力5.2.1原理溶菌酶可水解细菌的细胞壁，造成藤黄微球菌的溶解而引起溶液吸光度值的降低。-个溶菌酶活力单位定义为25℃，pH6.2条件下，使用藤黄微球菌悬浊液在450nm处每分钟引起吸光度变化0.001所需溶菌酶的量。5.2.2试剂和溶液藤黄微球菌ATCC4698或CICC10680。溶菌酶标准品相同来源的商品化溶菌酶标准品。磷酸盐缓冲液（0.1mo1/L，pH6.2）称取11.70g磷酸二氢钠（NaH2PO4.2H2O）、7.86g磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）及0.372g乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）溶于经高压灭菌的水中并稀释定容至1000mL。调整缓冲溶液pH至6.2±0.1。注：用小份缓冲溶液检查pH，以避免缓冲溶液被污染。如果需要，通过加入更多的磷酸二氢钠溶液或磷酸氢二钠溶液调整pH。底物溶液用磷酸盐缓冲液制备50mL藤黄微球菌悬浊液。使用前，底物于37℃培养30min。该底物溶液室温下可稳定2h。以磷酸盐缓冲液调分光光度计零点，然后测定底物溶液的吸光度，450nm下读数应为0.70±0.1。5.2.3仪器和设备分光光度计：精度土0.00 pH计。注：所用的器血应保持无菌，保证工作环境的清洁。5.2.4分析步骤试样溶液的制备准确称取（100.0土0.1）mg试样，置于50mL容量瓶中，加入磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容，充分混匀。再转移3mL上述试样制备溶液至100mL容量瓶中，用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容。标准溶液的制备精确称取50mg溶菌酶标准品于50mL容量瓶中，加入磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容，充分混匀（如果需要，冷冻该溶液以备后续测定）。转移3mL上述标准制备溶液至100mL容量瓶中，用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容。测定取3份标准溶液和3份试样溶液进行测定。2 QB/T 5030-201725℃室温下，将装有磷酸盐缓冲液的1cm比色血放入分光光度计，调整吸光度零点。吸2.9mL底物溶液于比色血，最初450nm处吸光度应为0.70士0.1，3min之内初始吸光度值变化不大于0.003时，方可开始测定。吸0.1mL标准溶液加入底物溶液，充分混合。记录3min吸光度值的变化，每15s记录1次吸光值。每分钟吸光度值变化应在0.03～0.08之间，若不在要求范围需调整试样溶液的浓度。重复操作测定试样溶液。反应1min后稳定，计算时