SNT 2341-2009松疱锈病菌检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2341--2009松疱锈病菌检疫鉴定方法Quarantine identification of Cronartium spp.2009-07-07 发布2010-01-16实施3.中华人民共和国发布造喜行:国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2341—2009前言本标准的附录 D 为规范性附录,附录 A、附录 B、附录 C为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理季员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局和中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王颖、程颖慧、章桂明、康林、陈枝楠、杨伟东、娄定风、吴翠萍。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 2341-2009松疱锈病菌检疫鉴定方法1 范围本标准规定了人境松属（Pinus spp.）及其他寄主植物，包括原木、木制品、木质包装和苗木上的松疱锈病菌的检疫鉴定方法。本标准适用于对来自松疱锈病发生国家和地区的所有松属植物和其他寄主植物中松疱锈病菌的检疫鉴定。2原理2.1分类地位北美松疱锈病菌 C.comandrae,香蕨柱锈松疱锈病菌（油松疱锈病菌 Cronartium coioide00菌C.comptoniae)属于真菌界（Fungi），担子爾亚门（Basidiomycotina），冬孢菌纲（Teliomycetes），锈菌目（Uredinales),栅锈科(Melampsoraceae),柱锈属(Cronartium)。2.2鉴定原理松疱锈病菌的形态特征是检疫鉴定的主要依据，同时参考病原菌的发生国家和地区（参见附录A）、寄主范围(参见附录 B)及症状。3仪器用具、放大镜、斧头、锯子、酒精灯、手术刀、手体视显微镜、显微镜、冰冻切片机、高压灭菌器、滴管镊子术剪、量筒、载玻片、盖玻片、玻片标签等4试剂和药品无水乙醇、冰乙酸、福尔马林、蒸馏水。5检验方法5.1 ·症状观察观察人境松属及其他寄主植物有无溃疡症状、有无孢子堆等。检查植株的枝干是否有流脂、皮层肿大、破裂并从裂缝中生出黄白色至橘黄色锈子器或锈黄色锈孢子的症状。秋季发病处可渗出蜜滴(为性孢子和蜜滴的混合物），蜜滴消失后可见“血迹”状斑。对转主寄主则检查叶片背面有无疱状夏孢子堆，在夏孢子堆中或其周围组织是否有冬孢子柱。5.2形态观察将可疑针叶组织样品或枝干皮层组织样品用FAA（福尔马林5mL、冰乙酸6mL、50%酒精89mL)固定脱脂处理2h～24 h后，徒手或冰冻切片备用。体视显微镜下选取切片完整的组织，制成玻片，在显微镜下观察病原菌形态特征（参见附录C)。6鉴定特征松疱锈病菌侵染寄主植物,在寄主植物茎和枝干上产生不同的症状,C.coleosporioides 在寄主植物的茎和枝条上形成的终年溃疡症状通常是长形（长宽比超过10 倍）、钻石形、常环割小茎和枝条；而 C.coman-drae、C.comptoniae 在寄主植物的茎和枝条上形成纺锤形病斑;C.comandrae 锈孢子橙色，梨形、长梨形、卵形或椭圆形，通常上端尖,也称泪珠形，为该病原菌的典型特征；C.comptoniae、C.coleosporioides 锈孢子为1 SN/T 2341—2009卵形或椭圆形;锈孢子器包被丝也是区别这三种病原菌的重要特征。C.spp.在寄主上的症状以及病菌形态特征详见附录 D。7 结果判定如果病原菌在寄主上的症状和形态特征分别与第6 章中描述的相吻合，则可以判定为相应的松疱锈病菌。样品保存8松疱锈病菌的样品或病组织及玻片标本、图片资料等需保存至少6个月，以备复验、谈判和仲裁。保存期满后，样品应经高温高压灭菌或其他适当的方式进行除害处理。妥善保存检验报告及实验原始记录。 SN/T 录 A(资料性附录）松疱锈病菌地理分布A. 1 Cronartium coleosporioides 的地理分布广泛分布于哥斯达黎加、危地马拉、加拿大的阿尔伯塔省、不列颠哥伦比亚、马尼托巴、新不伦瑞克省、西北地区、新斯科舍省、安大略省、魁北克省、萨斯喀彻温省、育空地区以及墨西哥、美国的阿拉巴马州、阿肯色州、哥伦比亚州、佛罗里达州、乔治亚州、路易斯安那州、马里兰州、密西西比州、卡罗来那州南部和北部、田纳西州、德克萨斯州、维吉尼亚州西部。A.2 Cronartium comandrae 的地理分布广泛分布于加拿大的阿尔伯塔省、不列颠哥伦比亚、马尼托巴、新不伦瑞克省、西北地区、新斯科舍省、安大略省、魁北克省、萨斯喀彻温省、育空地区以及美国的阿拉巴马州、亚历桑那州、阿肯色州、加利福尼亚州、科罗拉多州、康涅狄格州、特拉华州、爱达荷州、伊利诺斯州、印地安州、爱荷华州、肯塔基州、马萨诸塞州、密歇根州、明尼苏达州、密西西比州、密苏里州