SNT 1819-2006进出口医用手套中胶乳蛋白质的测定 改进的Lowry法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T出口医用手套中胶乳蛋白质的测定改进的Lowry法Determination of latex protein in medical gloves for import and export-Modified Lowry method2006-08-28 发布2007-03-01实施腰中华人民共和国数码肪伪“发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1819—2006前言本标准参照ASTM D5712—1999《天然橡胶及其产品中水溶性蛋白质的测定——改进的Lowry法制定》。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国宁波出人境检验检疫局。本标准主要起草人：童鲁波、葛宣宁。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1819--2006进出口医用手套中胶乳蛋自质的测定改进的Lowry法1范围本标准规定了医用手套中胶乳蛋白质含量的测定方法。本标准适用于医用手套中胶乳蛋白质含量的测定。本标准胶乳蛋白质含量的测定范围:7 μg/dm²～200 μg/dm²。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要医用手套及天然橡胶制品中胶乳蛋白质可从缓冲溶液中抽提出来，并经沉淀除去可溶性干扰物，用Lowry方法，于分光光度计750nm波长处测量吸光度。4术语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.1稀释率 F dilution factor用于溶解样品萃取沉淀物的氢氧化钠容量（mI)与用以分解标准卵白蛋白萃取沉淀物的氢氧化钠容量（mL)之比率。注：例如,5mL测试抽取液,沉淀后用1.25 mL氢氧化钠溶解，标准卵蛋白质用氢氧化钠溶解，其溶解体积也为1.25 mL,则测试萃取物的稀释率与标准曲线稀释率相同。4.2胶乳蛋白质latex protein来自天然橡胶及其制品中的胶乳蛋白质和多肽。4.3定量检出限LOQ可定量测量并产生准确结果的最低蛋白质含量。LOQ定为10倍的标准偏差。5仪器设备5.1 离心机。5.2分光光度计。5.3旋涡混合器。5.4微量可调移液器(0.2 mL～5.0 mL)、容量瓶(50 mL、100 mL)。5.5聚丙烯试管：容量为50mL和10mL。 SN/T 1819--20066 试剂与材料6.1所用试验用水应符合 GB/T 6682 三级水要求，所用试剂均为分析纯或相当纯度的试剂。6.2 磷酸(p=1.68 g/mL)。6.3 盐酸(p=1.19 g/mL)。6.4 硫酸(p=1.84 g/mL)。6.5抽提溶液(0.025mol/L磷酸盐缓冲溶液，pH=7.4±0.2)：称取磷酸二氢钾KH,PO4)0.816g、磷酸氢二钠(NazHPO,12H,O)6.802 g,加永溶解并定容至1000 mL。6.6氢氧化钠溶液(0↓2mol/L)取饱和氢氧化钠溶液10.8mL,加水至1000mL后用盐酸标准溶液标定。6.7脱氧胆酸钠(DOc)溶液(1.5 g/L):称取 0.15g脱氧胆酸钠溶于水并定容至100 mL。6.8三氯乙酸(TCA)溶液(720 g/L):称取 72 g三氯乙酸溶解水中并定容于 100 mL。6.9磷钨酸(PTA)溶液(720 g/L):称取72g磷钨酸溶解水中并定容于100 mL。6.10碱性酒石酸钠溶液：称取 2.22g碳酸钠（NazCO,）、0.44g氢氧化钠（NaOH)、0.18g酒石酸(C,H,Oz),溶于水并定容至 100 mL。6.11硫酸铜溶液：称取 7.0g硫酸铜(CuzSO.：5H,0)溶于水并定容至 100 mL。6.12福林(Folin)试剂;称取100g钨酸钠(Naz WO4·2H²O)、25 g钼酸钠(NazMoO4·2H²O)，加人蒸馏水700mL、磷酸50mL、盐酸100mL;溶解后放人2L回流装置中，以小火回流10h，再加人150g硫酸锂(LizSO4）,蒸馏水 100 mL及数滴溴水，然后开口继续煮沸15min，以除去过量的溴,冷却后定容至 1000 mL。过滤,贮于棕色瓶中。6.13蛋白质标准液：蛋白质标准储备液.1.00.mg/ml，冷藏条件下溶液能贮存48h;温度为一18℃时，可贮存2个月；融化时，要求用水浴加热到45℃并保温15min。注：蛋白质标准液可从临床检验质控中心获得,冷藏时间为累计时间。为进一步避免反复的冷冻和融化，建议将蛋白质母液分几份贮存，每份足够制备一条标准曲线,或