SN 1590-2005进出口食品中苏丹Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ检测方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1590—2005进出口食品中苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、V检测方法Determination of Sudan I ,Sudan I ,Sudan II and Sudan Vin foodstuffs for import and export2005-05-20 发布2005-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防 SN/T 1590—2005前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出人境检验检疫局本标准主要起草人：王凤池、马振栋、陈瑞春、吕红英、郭春海。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1590--2005进出口食品中苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、V检测方法1范围本标准规定了进出口食品中苏丹 I、ⅡI、Ⅲ、IV的液相色谱(HPLC)测定方法和液相色谱一质谱(HPLC-MS/MS)确证方法。本标准适用于辣椒、调味品、肉制品中苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV的检测。2 测定方法2.1方法提要样品中的苏丹I、Ⅱ、ⅢI、IV用正已烷提取，提取液经氧化铅柱净化，甲醇-水溶液洗脱，洗脱液用配紫外可见检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量，或用乙腈提取直接用HPLC测定。对于用HPLC方法检出阳性的样品，采用HPLC-MS/MS方法进行定性确证。2.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水，配流动相水为超纯水。2.2.1 正已烷。2.2.2丙酮。2.2.3乙腈(HPLC级)。2.2.4甲醇（HPLC级）。2. 2. 5三氯甲烷。2.2.6甲醇-水溶液（98+2)：2mI.水用甲醇定容至100mL。2.2.7中性氧化铝：100目～200目，500℃灼烧4h，贮于干燥器中备用，使用前130℃活化4h。2.2.8苏丹 I、I、Ⅱ、IV标准品:纯度≥98%。2.2.9标准储备液：分别精确称取苏丹I、ⅡI、Ⅲ、IV标准品各100 mg,分别用三氯甲烷溶解，最后用正已烷各自定容至100mL，配制成1.0mg/mL的标准储备液。此溶液在1℃～4℃下保存。2.2.10混合标准中间液：移取苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV标准储备液各 5mL至100mL容量瓶中，用正已烷定容至刻度。配制成混合标准中间液，浓度为 50 μg/mL。2. 2. 11混合标准工作液：根据需要,取适量混合标准中间液,用甲醇稀释至所需浓度。2.3仪器和设备2.3.1高效液相色谱仪配有紫外-可见检测器。2.3.2高效液相色谱-质谱联用仪。2.3.3平板摇床。2.3.4走超声波清洗器。2.3.5均质器。2.3.6旋涡混和器。2.3.7固相萃取仪及配件（贮液器，连接头）。2.3.8净化柱：塑料柱，6.5cm×1.4cm（内径）,准确称取3.0g已活化的中性氧化铝填人，敲击，使之填实，安装到固相萃取仪上待用。2.3.9 真空泵。1 SN/T 1590—20052.4测定步骤2.4.1提取甜椒或红辣椒粉、粉状调味品：称取10g(准确至0.01g)已粉碎好的样品于100mL具塞锥形瓶中，准确加入50 mL正已烷，在平板摇床上振荡 10 min，超声波水浴中超声 15min。静置，将提取液过滤,用2.4.2的步骤净化。调味辣椒酱、原味辣椒酱：称取20g(准确至0.01g)已粉碎好的样品于100mL具塞锥形瓶中，准确加人50 mL正已烷，均质2min，超声波水浴中超声15 min。静置，将提取液过滤，用2.4.2的步骤净化。肉制品：称取20g(准确至0.01g)样品于150mL具塞锥形瓶中，准确加人100mL乙腈，均质2min，超声波水浴中超声 15 min。静置，将提取液过滤，滤液过0.45 μm滤膜后进 HPLC分析。2.4.2净化准确移取7.5mL澄清滤液，直接注人氧化铝柱中，以自然滴速通过氧化铝柱，待溶液全部流出后，先加入2mL丙酮到柱中，将贮液器连接到氧化铝柱上，再向贮液器中加人13mL丙酮，淋洗液滴完后用真空泵将柱子抽干。再用15mL甲醇-水溶液(98十2)洗脱，收集洗脱液于离心管中，用真空泵将残余洗脱液抽下合并于离心管中,并用甲醇定容至15 mL混匀,过0.45 μm滤膜后进 HPLC分析。2.4.3 测定7液相色谱条件a）色谱柱:Cls，250 mm×4.6mm(内径),填料粒度5μm,或相当者；b)流动相：乙腈-水(95+5），流速：1.0mL/min;c）#检测波长：500nm；d）柱温:35℃;e）进样量:40 μL。色谱测定根据样液中苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV的含量情况，选定浓度相近的混合标准工作液，混合标准工作液中的苏丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV的响应值应在仪器检测的线性范围内。对混合标准工作液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，苏丹 I、I